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薄層色譜儀的操作和應用

來源:上海科哲生化科技有限公司   2022年04月12日 18:32  
  一、薄層色譜操作
 
  ⑴制板(以硅膠板為例)
 
  選擇合適的玻璃板(經常使用顯微鏡上的載玻片),依次用水和乙醇洗凈,晾干。取適量薄層色譜用的硅膠,加適量蒸餾水調成糊。調制時慢慢攪拌,勿使產生氣泡。將糊倒在玻璃板上,搖動攤平,晾干。使用前放入烘箱內,在105-115oC左右烘干40-50分鐘。冷卻后使用。
 
  ⑵點樣
 
  將試樣用最少量展開劑溶解,用毛細管蘸取試樣溶液,在薄層板上點樣。在樣點上輕輕畫出一條平行于玻璃板底邊的細線。薄層色譜板載樣量有限,勿使點樣量過多。
 
  ⑶展開
 
  吹干樣點,豎直放入盛有展開劑的有蓋展開瓶中。展開劑要接觸到吸附劑下沿,但切勿接觸到樣點。蓋上蓋子,展開。待展開劑上行到一定高度(由試驗確定適當的展開高度),取出薄層板,再畫出展開劑的前沿線。
 
  ⑷顯色,計算Rf值
 
  揮發干展開劑,選擇合適的顯色方法顯色。量出展開劑和各組分的移動距離,計算各組分的相對移動值。
 
  二、薄層色譜應用
 
  ⑴可用于判斷兩個化合物是否相同(同一展開條件下是否有相同的移動值);
 
  ⑵可用于確定混合物中含有的組分數;
 
  ⑶可用于為柱色譜選擇合適的展開劑,監視柱色譜分離狀況和效果;
 
  ⑷可用于檢測反應過程。

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