單細胞鋪板在鋪細胞時要注意手法

來源：Bio-Techne 2022年04月20日 13:42

單細胞鋪板是細胞實驗中最常見又必須掌握的一門技術(shù)，看似簡單，我們卻經(jīng)常遇到：如細胞居中或者中間稀疏等不均勻分布的現(xiàn)象，導致我們只能扔掉，重新鋪板。既耽擱時間又浪費了細胞及培養(yǎng)板等資源。

　　單細胞鋪板要鋪成那種很均勻的單層細胞，手法如下：

　　1、細胞板子先加入一定量(一般是總量培養(yǎng)基的1/5)的培養(yǎng)基，放入孵箱中放置10-20min；

　　2、在滴入細胞時，細胞板子與通風櫥有一定的角度，沿著板壁的孔邊緣滴入；

　　3、滴入后，呈“8”字方法搖晃5-8次；4、置于水平臺上，放置10-20分鐘；5、放入孵箱。

　　其實單細胞鋪板不一定都需要單個單個的那么均勻，比如做免疫熒光時，因為這個樣子可以同時檢測到單個細胞的形態(tài)，另外又可以照一點低倍的用作于統(tǒng)計，所有的細胞都在一個環(huán)境中。特別說明一下：這里的多也只是相對于多，細胞也是單層的。

　　鋪細胞時要注意手法如下：

　　1、細胞板子不需要提前用培養(yǎng)基潤洗，直接從邊上滴入混有細胞的培養(yǎng)基；

　　2、放置30s-1min后，前后搖晃5-8次；

　　3、放在水平臺上靜置2-5min；

　　4、放入孵箱。

　　一般在提取蛋白或者提取RNA的時候有時會這樣鋪板，因為有些細胞刮刀不好用，沒有辦法刮到周圍的，想要鋪中間多，周圍少的板子，手法如下：

　　1、細胞板子不需要提前潤洗，從中間滴入進去后；

　　2、把板子朝一個方向順時針或者逆時針旋轉(zhuǎn)3-5圈；

　　3、水平臺上靜置2-5min；

　　4、放入孵箱。

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