細胞轉染實驗常用步驟:
1. 轉染試劑的準備
① 將400ul去核酸酶水加入管中,震蕩10秒鐘,溶解脂狀物。
② 震蕩后將試劑放在-20攝氏度保存,使用前還需震蕩。
2. 選擇合適的混合比例(1:1-1:2/脂質體 體積:DNA質量)來轉染細胞。在一個轉染管中加入合適體積的無血清培養基。加入合適質量的MyoD或者EGFP的DNA,震蕩后在加入合適體積的轉染試劑,再次震蕩。
3. 將混合液在室溫放置10―15分鐘。
4. 吸去培養板中的培養基,用PBS或者無血清培養基清洗一次。
5. 加入混合液,將細胞放回培養箱中培養一個小時。
6. 到時后,根據細胞種類決定是否移除混合液,之后加入*培養基繼續培養24-48小時。
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