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應(yīng)用干貨 | 輕松解鎖寡核苷酸純化解決方案

來源:安捷倫科技(中國)有限公司   2022年05月24日 13:27  

               

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研究表明,合成寡核苷酸核酸是極具前景的治療藥物,也是用于研究和診斷二代測序(NGS)的重要組成部分。這些寡核苷酸的大小、序列復(fù)雜度和整體修飾存在差異。小寡核苷酸的大小范圍從幾個核苷酸到 40 或50 個堿基,并包含不同的 DNA 或 RNA 修飾。除了它們的一級結(jié)構(gòu)外,這些分子可以為單鏈或雙鏈結(jié)構(gòu),并包含分子或生物標(biāo)簽修飾。較大的分子(包括向?qū)NA 或 NGS 引物和探針)包含 50–200 個堿基,并根據(jù)其具體應(yīng)用添加了不同的修飾和標(biāo)簽。RNA 治療藥物的序列可能包含數(shù)千個堿基,其通過體外生產(chǎn)合成,需要考慮*的純化要求。


序列衍生的結(jié)構(gòu)形成和雜質(zhì)與全長產(chǎn)物相似,因此優(yōu)化純化和分析流程對于開發(fā)終的純分子至關(guān)重要


多樣化的分子

然而,寡核苷酸的多樣性要求填料具有多種粒徑和孔徑,能夠應(yīng)對純化和分析挑戰(zhàn)。PLRP-S 和 PL-SAX 等聚合物顆粒填料是分析和純化寡核苷酸的理想選擇。由于這些材料具有熱穩(wěn)定性和化學(xué)穩(wěn)定性,因此可以實現(xiàn)多種技術(shù)的應(yīng)用:

01

在高溫下運行可以加快傳質(zhì),提高長鏈寡核苷酸的分離度

02

高 pH 等變性條件可用于避免在分析和純化過程中修飾、自我互補和富含 GC 的寡核苷酸聚集

03

在高 pH 條件下進行陰離子交換可以抑制單個堿基的電離,從而能夠分離寡核苷酸的磷酸二酯和硫代磷酸酯形式


輕松滿足各種純化需求:從 siRNA 到 mRNA

安捷倫了解寡核苷酸的多樣性,無論分子大小或純化規(guī)模如何,都能為您提供合適的填料和孔徑。Agilent PLRP-S 和 PL-SAX 色譜柱都能為您提供出色的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性。此外,它們有多種孔徑可供選擇,能夠滿足您*的寡核苷酸純化需求。

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對于寡核苷酸等大分子而言,選擇合適的孔徑是需要考慮的一個重要因素。安捷倫提供一系列孔徑,以平衡分離度和結(jié)合容量

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Agilent PLRP-S 色譜柱



小規(guī)模分析的理想選擇,并可隨著生產(chǎn)需求的增長而擴展

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反相填料 – 用于離子對反相模式

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五種孔徑:100 ?、200 ?、300 ?、1000 ? 和 4000 ?

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填料粒徑范圍從 3 µm 到 50 µm


Agilent PL-SAX 色譜柱

無論是向?qū)?RNA 還是核酸大分子,都能為您提供所需的純度

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出眾的聚合物陰離子交換填料

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兩種孔徑:1000 ? 和 4000 ?

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填料粒徑范圍從 5 µm 到 30 µm



結(jié)語


從分析級、半制備級和制備級規(guī)模到散裝材料,在所需的規(guī)模擁有相同質(zhì)量的固定相至關(guān)重要,Agilent PLRP-S 和 PL-SAX 色譜柱使您無論生產(chǎn)規(guī)模如何,都可以使用相同的優(yōu)化填料




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寡核苷酸純化解決方案


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