如何使用熱板測痛儀評價動物神經疼痛模型
一.熱板法實驗
熱板法是鎮痛藥物篩選中常用的一種方法,也是一種能確定區分中樞神經末梢神經鎮痛機理的方法,有較廣的使用范圍,熱板法對動物組織損傷最小,動物可反復使用,痛反應潛伏期較長,便于觀察及測出藥物之間的較小差異,比較出藥物作用的強弱快慢及持續時間。
二、實驗儀器
智能熱板儀通過測試大鼠和小鼠的疼痛反應時間,進行快速精確地篩選麻醉型鎮痛藥物。如針對一組大鼠,在服用藥物前,測量該組大鼠在熱盤上舔爪的平均時間,該時間對應的是大鼠對熱刺激的反應時間,在服用鎮痛或麻醉藥物后,測量該組大鼠在熱盤上舔爪的平均時間,該時間對應的是大鼠服用藥物后對熱刺激的反應時間,對兩組時間值的比較,評估鎮痛或麻醉藥物對大鼠的效果。該產品適用于大、中專醫科院校、科研單位進行藥理鎮痛實驗教學及科研工作。
三.實驗方法
1、實驗前預篩選:以小鼠為例,取若干只小鼠,實驗前24h腹部去毛,將小鼠逐只置于(55.0±0.5)℃熱板儀上,測定記錄小鼠的痛閾值,以舔后足為痛覺指標,挑選痛閾值為5~30s的小鼠進行實驗。
2、給藥前痛閾值的測定:將篩選出的小鼠逐只置于熱板儀上,各測2次痛閾(間隔10min),取平均值作為小鼠基礎痛閾即給藥前的正常痛閾值。
3、給藥后痛閾值的測定:在服用鎮痛或麻醉藥物后,測量小鼠在熱盤上舔爪的平均時間,該時間對應的是小鼠服用藥物后對熱刺激的反應,作為給藥后痛閾值。若小鼠在熱板儀上60s內仍無痛覺反應,立即取出按60s計算并統計給藥前后的痛閾值。
4、痛閾提高的百分率:對兩組時間值的比較,評估鎮痛或麻醉藥物的效果。
計算方式:痛閾提高的百分率=[(給藥后的痛閾-基礎痛閾)/基礎痛閾]×100%。
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