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艾美捷sGAG檢測試劑盒,Blyscan染料來助攻!

來源:武漢艾美捷科技有限公司   2022年06月07日 16:51  

Glucosamine Sulfate,用于預防和治療各種類型的骨性關節炎,如膝關節、髖關節、脊柱、肩、手、手腕和踝關節等部位的及全身性的骨性關節炎。本藥可直接抗炎,緩解骨性關節炎的疼痛癥狀,改善關節功能,并阻止骨性關節炎病程的發展。且不會出現因前列腺素受抑制而引起的不良反應。

 

接下來小編給大家說的這個艾美捷sGAG檢測試劑盒——專門用于檢測樣本中的硫酸氨基聚糖,它采用常規生化方法,通過標準曲線和比色,可定量分析總硫酸化多糖(氨基聚糖和蛋白聚糖)的含量,亦可測定O端和N端硫酸氨基多糖的比值。主要起作用的是Blyscan染料,它可以特異性的與氨基聚糖和蛋白聚糖上的硫酸多糖組分結合,該方法不適于檢測已經降解的硫酸化雙糖片段。

 

艾美捷sGAG檢測試劑盒的特點:

可檢測廣泛的蛋白多糖,可檢測的氨基多糖包括硫酸角質素、硫酸皮膚素、硫酸肝素,不適合檢測包含海藻酸的樣品,因為它們含有糖醛酸。該試劑盒也不能對透明質酸定量,但透明質酸并不會對硫酸化氨基多糖的檢測產生干擾。細胞培養基中20%的胎牛血清也不會干擾實驗。該方法檢測靈敏度為5ug,所需時間為1小時。

 

艾美捷sGAG檢測試劑盒檢測樣本:

可來自軟骨組織、動脈組織、肺組織、皮膚組織、腫瘤組織、細胞核組織提取物、細胞培養液、羊水和尿液

 

Blyscan檢測流程圖:

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艾美捷sGAG檢測試劑盒實驗步驟 :

1. 繪制標準曲線

2. 待測樣品的處理:

50ul待測樣品進行實驗。如果反應物在656nm初的吸收峰大于1.5,則對樣品進行稀釋,待測樣樣品濃度落入標準曲線中段時,準確度較高。

3. 硫酸氨基聚糖—染料復合物的獲得

1.0mlBlyscan染料溶液到待測樣本中,充分混勻,待不溶物出現,離心,棄上清,則獲得紫色的硫酸氨基聚糖—染料復合物

4. 硫酸氨基聚糖—染料復合物中染料的釋放

加入1.0ml的染料釋放劑,充分混勻。溶解5min以上,使染料充分釋放

5. 測定

用分光光度計于波長656nm處測定,或使用colorimeter紅色濾光片測定

 

sGAG檢測試劑盒已發表文章,超500篇,僅摘錄展示部分:

1Ahn, G., Min, K., Kim, C., Lee, J., Kang, D., reports, J. W.-S., & 2017 Precise stacking of decellularized extracellular matrix based 3D cell-laden constructs by a 3D cell printing system equipped with heating modules. Nature.

2Makris, E., & Responte, D. (2014). Developing functional musculoskeletal tissues through hypoxia and lysyl oxidase- induced collagen cross-linking. PNAS 111, E4832 E4841.

3Prewitz,M.C., Seib,F.P., von Bonin,M., Friedrichs,J., Sti+ el,A., Niehage,C., M++ller,K., Anastassiadis,K., Waskow,C. and Hoflack,B. (2013) Tightly anchored tissue-mimetic matrices as instructive stem cell microenvironments. Nature Methods 10, 788 794

4Song,J.J., Guyette,J.P., Gilpin,S.E., Gonzalez,G., Vacanti,J.P. and Ott,H.C. (2013) Regeneration and experimental orthotopic transplantation of a bioengineered kidney. Nature medicine, 19, 646-651.


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