三级片视频播放,精品三级片在线观看,A级性爱视频,欧美+日韩+国产+无码+小说,亲子伦XX XX熟女,秋霞最新午夜伦伦A片黑狐,韩国理伦片漂亮的保拇,一边吃奶一边做边爱完整版,欧美放荡性护士videos

產品推薦:氣相|液相|光譜|質譜|電化學|元素分析|水分測定儀|樣品前處理|試驗機|培養箱


化工儀器網>技術中心>其他文章>正文

歡迎聯系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

大鼠滑膜細胞的制備方法

來源:武漢尚恩生物技術有限公司   2022年06月24日 16:14  
  大鼠滑膜細胞的制備方法:
 
  滑膜細胞的培養:將分離的滑膜組織用含青霉素200kU/L、鏈霉素200mg/L的D-Hank's液漂洗3次以減少污染機會;去掉脂肪組織,將16個滑膜組織樣本平均分為A、B兩份。將A份不加處理分為A1、A2、A3、A4、A5、A6、A7、A8八個樣品,將B份用手術剪剪碎后分為B1、B2、B3、B4、B5、B6、B7、B8八個樣品。分別采取4種不同方法進行處理。
 
  1)不加消化酶消化法:分別將A1、A2、B1、B2離心洗滌2次(2500r/min,離心6min),吸棄上清液,加入100μL100%的FBS混勻,用移液槍吸出注入培養瓶中,放入CO2培養箱烘干15min,再將A1、B1加入3mL體積分數20%的FBS吹打均勻,A2、B2用少量體積分數20%的FBS人工貼壁,再加入3mL體積分數20%的FBS。
 
  2)加Ⅱ型膠原酶消化法:將A3、A4、B3、B4離心洗滌2次(2500r/min,離心6min),吸棄上清液,吸取膠原酶Ⅱ至離心管中,輕輕吹打使組織塊重新懸浮,移入培養瓶,放入CO2培養箱消化,觀察組織成絮狀后,加入1mL體積分數20%FBS終止消化,用移液槍吸出,移入離心管離心(2500r/min,離心6min),棄上清液,放入培養瓶中,A3、B3加入3mL體積分數20%FBS,吹打均勻;A4、B4用少量體積分數20%的FBS人工貼壁,再加入3mL體積分數20%的FBS。
 
  3)加胰蛋白酶消化法:將A5、A6、B5、B6離心洗滌2次(2500r/min,離心6min),吸棄上清液,吸取胰蛋白酶至離心管中,輕輕吹打使組織塊重新懸浮,移入培養瓶,放入CO2培養箱消化,觀察組織成絮狀后,加入體積分數20%FBS終止消化,用移液槍吸出,移入離心管離心(2500r/min,離心6min)。棄上清液,放入培養瓶中,A5、B5加入3mL體積分數20%FBS,吹打均勻;A6、B6用少量體積分數20%的FBS人工貼壁,再加入3mL體積分數20%的FBS。
 
  4)先加Ⅱ型膠原酶消化法再加胰蛋白酶消化:將A7、A8、B7、B8離心洗滌2次(2500r/min,離心6min),吸棄上清液,吸取膠原酶Ⅱ至離心管中,輕輕吹打使組織塊重新懸浮,移入培養瓶,放入CO2培養箱消化,觀察組織成絮狀后,取出培養瓶,仔細吹打使組織塊分散,將未黏附細胞移入離心管離心(2500r/min,離心6min),棄上清液,再加D-Hank's液洗滌,離心,吸棄洗滌液,重復離心3次,吸取胰蛋白酶至離心管中,輕輕吹打使組織塊重新懸浮,移入培養瓶,放入CO2培養箱消化,消化結束取出培養瓶,加入體積分數20%FBS終止消化,用移液槍吸出,移入離心管離心(2500r/min,離心6min)。棄上清液,放入培養瓶中,A7、B7加入3mL體積分數20%FBS,吹打均勻;A8、B8用少量體積分數20%的FBS人工貼壁,再加入3mL體積分數20%的FBS。
 
  5)結果:培養9d后,觀察各培養瓶中細胞的成活個數和生長狀況,組織剪碎不加消化酶人工貼壁培養的細胞得數為2.03×106,是所有培養方法中細胞的數最多的。細胞活力為95%,與組織剪碎加膠原酶Ⅱ消化后人工貼壁培養同為各種培養方法中細胞活力*強的,綜合考慮*方法為組織剪碎不加消化酶人工貼壁培養。

免責聲明

  • 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
  • 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
  • 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。
企業未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618
主站蜘蛛池模板: 南丹县| 松江区| 临朐县| 黄梅县| 太白县| 双柏县| 玉环县| 宁阳县| 剑阁县| 玉环县| 繁昌县| 渑池县| 沁源县| 梁平县| 舒兰市| 和硕县| 洮南市| 四川省| 边坝县| 宜兰县| 墨脱县| 涟源市| 丹阳市| 准格尔旗| 东乌珠穆沁旗| 芮城县| 炉霍县| 巴林右旗| 新闻| 固原市| 永新县| 永和县| 安溪县| 新干县| 吴江市| 栾城县| 搜索| 杭州市| 武隆县| 察隅县| 巴林右旗|