mRNA，中文譯名“信使核糖核酸”，是由DNA的一條鏈作為模板轉(zhuǎn)錄而來的、攜帶遺傳信息能指導蛋白質(zhì)合成的一類單鏈核糖核酸。以細胞中基因為模板，依據(jù)堿基互補配對原則轉(zhuǎn)錄生成mRNA后，mRNA就含有與DNA分子中某些功能片段相對應的堿基序列，作為蛋白質(zhì)生物合成的直接模板。

mRNA 作為基因和蛋白質(zhì)之間的重要橋梁，科學家對其的研究也一直沒有停歇。而mRNA 疫苗作為藥物，在近幾年抗擊xinguan的征程中更是大放異彩，輝瑞-BioNTech，莫德納先后推出xinguan疫苗，國內(nèi)眾多醫(yī)藥公司，例如沃森生物-艾博生物，斯微生物等也紛紛做出了不少成績。

質(zhì)控重要性

1.mRNA疫苗的質(zhì)控是為了確保研發(fā)的成品有效性，安全性和可靠性
2.從早期研發(fā)到生產(chǎn)中，原材料，加工流程以及配方輔料等都有可能會發(fā)生變化，因此更需要可靠的質(zhì)控方法來確保成品的質(zhì)量
3.如果不能及時發(fā)現(xiàn)質(zhì)量問題，導致嚴重的臨床試驗結(jié)果，會對消費者（患者）產(chǎn)生重大的安全隱患，會影響藥物的審批
4.不合格的樣品可能會導致
①不正確的PCR 擴增
②質(zhì)粒線性化不佳
③低質(zhì)量的轉(zhuǎn)錄反應
④RNA產(chǎn)物中存在DNA殘留
⑤降解的RNA

mRNA疫苗質(zhì)控的指導原則
我國在2020年頒布的《xinguan病毒預防用mRNA疫苗藥學研究技術(shù)指導原則（試行）》和2022年3月美國藥典USP頒布的《Analytical Procedures for mRNA Vaccine Quality》  上都明確指出了mRNA疫苗質(zhì)控的要求和基本解決方案，科學家們可以作為參考。

表 1 mRNA疫苗質(zhì)控指標和方法（參考：《Analytical Procedures for mRNA Vaccine Quality》）

毛細管電泳在mRNA疫苗質(zhì)控的應用
接下來，魯大師就參考這兩份重要指導原則給大家介紹毛細管電泳法進行mRNA疫苗質(zhì)控的方法。

DNA模板質(zhì)控
檢測時間點：模板PCR擴增后

檢測目的：
1.檢測PCR產(chǎn)物濃度和片段長度，檢測我們的目的DNA是否已經(jīng)被擴增
2.檢測是否有鹽粒子污染

評判依據(jù)：
成功的PCR顯示為單峰，如果模板降解這會顯示多峰。
若基線不平整或者有釘子峰表示存在高鹽離子，若鹽粒子濃度高達100-200nM，會抑制mRNA 轉(zhuǎn)錄。

圖 1 正確的模板示意圖：如黑色峰圖顯示質(zhì)粒DNA，有插入片段峰，且長度在預期范圍。

RNA體外轉(zhuǎn)錄IVT 質(zhì)控
檢測時間點：體外轉(zhuǎn)錄純化后
檢測目的：檢測目的mRNA 轉(zhuǎn)錄是否成功，沒有發(fā)生降解；是否有模板DNA殘留
評判依據(jù)：mRNA和DNA 片段大小不同

1.模板殘留

2.mRNA完整性

圖 2 出現(xiàn)雜峰多峰表明RNA 發(fā)生降解

質(zhì)控儀器和產(chǎn)品

看到這里屏幕前的你一定很好奇，什么樣的儀器適合做毛細管電泳來做mRNA疫苗質(zhì)控呢？ 在這個領域，安捷倫是當之無愧的king。美國更是直接把安捷倫的毛細管電泳寫進了這次的mRNA疫苗指南，一整個的大安利。 而安捷倫的儀器也是陪伴著輝瑞疫苗從研發(fā)到生產(chǎn)的全過程。

安捷倫有兩款毛細管電泳儀器，都非常適合！
1.芯片式毛細管電泳-------安捷倫2100生物分析儀
2.陣列式毛細管電泳-------安捷倫片段化分析儀（5200,5300和5400）

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