ROC液相分析柱共有三種基本類型:液-液,液-固和離子交換。液-液色譜柱不那么受歡迎,因為它們的穩定性有限且不方便。在液-固色譜柱中,固定相為固體,分析物吸收到固定相上,從而分析混合物的成分。通常,HPLC在分析柱之前有一個保護柱,以保護并延長分析柱的使用壽命。保護柱的作用是去除色譜柱上不可逆的顆粒物、污染物和分子等。
ROC液相分析柱是色譜分析過程中重要的部分,相當于人體的“心臟”。根據自己要分析的樣品去選擇合適的液相色譜柱,需要考慮不同參數將會造成什么影響,比如粒徑、酸堿性、極性和分子量大小等。
即使是液相色譜柱也分很多類型,比如正相、反相、C18柱、親水性色譜柱等等。只有了解影響分析柱性能的因素,才能結合目標分析物的性質、需要達到的分析效果及實驗室條件來選擇適合的色譜柱。
液相色譜分析中,色譜柱的選擇直接影響了分離效果的好壞,選擇合適的色譜柱可以縮短方法開發所需的時間,并且使方法更具穩定性。但是現在市場上色譜柱種類繁多,不同類型的色譜柱分離對象不同,因此,要做合適的選擇,要對此有一定的認識和了解。
在設定選擇樣品分析的HPLC方法時,首先需要根據化合物的分子量大小,極性大小等因素選擇合適的分離模式,在適當的分離模式下去選擇合適的色譜柱及流動相。在很多色譜分析中涉及的化合物樣品絕大部分都可以使用反相分離模式。
硅膠純度對峰形有很大液相,硅膠雜質和殘留的金屬離子會影響樣品的峰形,如果硅膠表面的金屬含量高會影響堿性化合物的峰形,易發生拖尾。
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