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酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）因其具有敏感性高、特異性強等優(yōu)點，被廣泛應(yīng)用于臨床檢測中的各種抗原和抗體的測定。盡管ELISA操作簡單，但是小實驗里也蘊含著大文章，ELISA操作各個環(huán)節(jié)對實驗的檢測效果影響較大，稍不注意就會產(chǎn)生假陽性或假陰性的結(jié)果。
因ELISA的靈敏度較高，則應(yīng)該按規(guī)定將血清稀釋至適當?shù)谋稊?shù)，以降低非特異性反應(yīng)，使特異性的抗原抗體反應(yīng)充分體現(xiàn)出來。 加樣品時，單孔用量要求：≥20ul/指標，如需要做2個復(fù)孔則血量≥60ul/指標。如果用量充足，最好提供50ul/孔/指標。具體用量也需根據(jù)試劑盒的要求而定。 吸取樣品時，加樣槍頭不應(yīng)粘附多余的液體；加樣時不可90度向孔中滴加液體，否則會導(dǎo)致液體殘留在吸頭上，加樣不準確。正確加樣方法應(yīng)為45度，吸頭貼著孔壁和液面的交界處加入。
加樣時速度不可過快，否則無法保證微量加樣的準確性和均一性；要避免樣品加在孔壁上部而產(chǎn)生非特異性吸附。不可將樣品濺出以避免對鄰近孔產(chǎn)生污染。
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