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暗視場生物顯微鏡使用特殊的暗視場聚光鏡使照明光線偏移而不進入物鏡，只有樣品的散射光進入物鏡。
下面讓我們一起來了解一下暗視場生物顯微鏡的使用注意事項有哪些吧
1、制作暗視場光擋時，若光擋直徑過小或光擋的中心位置不正，則不能全部擋掉直射光，視野不暗，樣品與背景的明暗反差不明顯;若光擋直徑過大，聚焦到樣品上的光線不足，使暗視野顯微鏡觀察到的樣品亮度不佳，影響觀察效果。
2、使用暗視野顯微鏡時，照明光源的照明強度要高，否則樣品的反射光強度不夠，影響觀察效果。
3、若視場中樣品與背景明暗反差不強時，可以上下調節聚光器的位置，使視場內的反差提高。
4、要求使用的載玻片和蓋玻片必須無劃痕且無灰塵，物鏡前透鏡也必須清潔無塵。載玻片與蓋玻片的厚度應符合標準。載玻片太厚，聚光器的焦點將落在載玻片內，達不到被檢物體的平面上;使用油鏡頭時，由于物鏡的工作距離很短，甚至無法調焦，從而看不到或看不清被檢物體。
5、載玻片的厚度要適宜，照明光束經暗視野顯微鏡聚光器后，產生空心照明光錐，即中心為暗區。而反射光的焦點在聚光器上透鏡表面之上，很短的距離。因此，載玻片的適宜厚度為0.8～1.2mm。
6、物鏡的數值孔徑必須小于聚光器的數值孔徑，否則會因物鏡的孔徑角大于暗視野顯微鏡聚光器所形成的照明光束中心暗區的角度，致使部分照明光線射入物鏡，破壞或降低了暗視場的照明。
7、暗視野顯微鏡鏡檢時室內要暗，如果沒有這樣的條件，應盡可能使用遮光裝置，以阻止目鏡周圍的光線射入。
8、在進行油鏡鏡檢時，由于油內的雜質和氣泡的漫反射，會妨礙暗視野顯微鏡鏡檢效果，所以要求盡可能地除掉油內的雜質和氣泡。
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