重組蛋白是應用重組DNA或重組RNA的技術,從而獲得具有一定功能和活性的蛋白質,是研究生物學過程的重要工具,被廣泛應用于蛋白結構研究、細胞功能試驗、免疫檢測試劑、重組蛋白藥物、診斷試劑開發等眾多領域。
體外重組蛋白的生產主要包括四大系統:原核蛋白表達,哺乳動物細胞蛋白表達,酵母蛋白表達及昆蟲細胞蛋白表達。
重組蛋白表達系統介紹:
(1)目前應用較廣泛的表達系統有三大類,大腸桿菌(Esherichia coli)表達系統、酵母表達系統、CHO細胞表達系統。其中,大腸桿菌是表達重組蛋白常用的宿主菌,已應用于許多具有重要藥用價值蛋白的生產。大腸桿菌表達系統具有許多優點,如生長快、培養成本低、遺傳背景清楚和易實現高密度培養等。大腸桿菌DH5α是一種誘變菌株,主要表現對外源DNA的免疫缺乏。大腸桿菌DH5α是基因工程常用的宿主菌之一,相比于正常菌種缺少了一定的免疫機制。
(2)不同的表達系統和培養方法顯著影響下游的處理過程,目標蛋白表達是否形成包涵體,目標蛋白表達的定位(胞內、細胞膜內、周質空間和胞外),蛋白表達的量都依賴于所選擇的的表達系統。
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