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超微量分光光度計(jì)進(jìn)行核酸定量的應(yīng)用分析

來源:上海沃元科技有限公司   2022年08月10日 15:53  
  核酸的定量是超微量分光光度計(jì)使用頻率較高的功能。可以定量溶于緩沖液的寡核苷酸,單鏈DNA、雙鏈DNA,以及RNA。核酸的高吸收峰的吸收波長260nm。
  
  由于每種核酸的分子構(gòu)成不一,因此其換算系數(shù)不同。定量不同類型的核酸,事先要選擇對應(yīng)消光因子。如:1OD的吸光值分別相當(dāng)于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig。
  
  測試后的吸光值經(jīng)過上述系數(shù)的換算,從而得出相應(yīng)的樣品濃度。除了核酸濃度,分光光度計(jì)顯示幾個(gè)非常重要的比值表示樣品的純度,如A260/A280的比值,用于評估樣品的純度,因?yàn)榈鞍椎奈辗迨?80nm。
  
  純凈的樣品,比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8或者2.0,表示存在蛋白質(zhì)或者酚類物質(zhì)的影響。
  
  A230表示樣品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,較純凈的核酸A260/A230的比值大于2.0。
  
  超微量分光光度計(jì)可以像普通的紫外-可見分光光度計(jì)一樣行使功能。如BIO-DLMicroDrop可以顯示從185到910nm的光波下樣品的吸光值。可以同時(shí)指定檢測40個(gè)波長下的吸光值并把數(shù)據(jù)顯示在報(bào)告中。

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