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Worthington公司抗生物素蛋白的分子特征和應用說明

來源:武漢艾美捷科技有限公司   2022年09月02日 17:05  

Worthington公司有關抗生物素蛋白歷史:

1916 年,貝特曼首先研究了生蛋清對動物的毒性作用。1927 年,Boas 證明“蛋清損傷”是由白蛋白中的一種蛋白質引起的。經確定,這種蛋白質與生物素結合形成“不可消化”復合物,不能從動物腸道或微生物從周圍介質中吸收(Boas 1924Pennington等人1942Woolley 和 Longsworth 1942 和 Hertz 1946 )。埃金 等人。首先分離出該蛋白質并將其命名為抗生物素蛋白(Eakin等人1940a和 1941)。

 

1963 年,Green 確定了抗生物素蛋白-生物素復合物 (10-15 M) 的解離常數,表明該復合物在體外具有J高的穩定性(Green 1963ab)。在 1970 年代后期和 1980 年代初期,抗生物素蛋白-生物素復合物的復合物形成是生物化學和免疫細胞化學中的有用工具(Guesdon等人1979Bayer 和 Wilchek 1980 和 Hsu等人。1981)。雞親和素的序列由 DeLange 和 Huang 于 1971 年確定。 cDNA 由 Gope等人克隆并測序。1987 年,Wallén等人對基因 ( avd ) 進行了克隆和測序。1995 年。

 

最近與抗生物素蛋白的研究發現其可用于多種癌癥治療(Lesch等人, 2010)。抗生物素蛋白及其衍生物繼續用于生物素化蛋白質的分離(Bolivar等人2008),并且它已被納入檢測尿液和血清中生物素水平的試驗中(Zarogiannis等人2007)。

 

抗生物素蛋白是一種糖蛋白,由四個相同的亞基組成。它是爬行動物、兩棲動物和鳥類蛋清的次要成分。在雞中,它在輸卵管中合成以響應孕酮,并在與炎癥和組織損傷有關的幾種組織中合成(Elo等人1979 和 Gope等人1987)。它以高親和力結合維生素生物素,因此被認為是對抗需要生物素的微生物的防御蛋白(Wallén等。1995)。抗生物素蛋白在配體和蛋白質之間表現出已知的最高自然親和力(Livnah等人, 1993)。

 

Worthington公司抗生物素蛋白分子特征:

該蛋白質含有一個 24 個殘基的信號肽。抗生物素蛋白基因 ( avd ) 由被三個內含子分開的四個外顯子組成 (Wallén et al. 1995)。盡管親和素與鏈霉親和素具有幾乎相同的二級、三級和四級結構,但這兩種蛋白質僅顯示出 30% 的序列同一性,并且被認為在進化上不相關(Laitinen等, 2006)。

 

抗生物素蛋白是一種基本的同型四聚體糖蛋白(Green 1964,以及 DeLange 和 Huang 1971)。碳水化合物部分是一種由四種氨基葡萄糖和五種甘露糖組成的多糖,與每個亞基的 Asn-17 相連(DeLange 和 Huang 1971)。每個相同的亞基結合一個生物素分子,色氨酸參與非共價結合。每個亞基折疊成一個八股反平行β桶,顯示上下拓撲。等。1998 年)。盡管親和素與另一種生物素結合蛋白鏈霉親和素具有幾乎相同的二級、三級和四級結構,但鏈霉親和素沒有被糖基化并且不易聚集。與鏈霉親和素相比,抗生物素蛋白對非結合生物素的親和力更高,但對結合生物素的親和力較低(Laitinen等人, 2006 年)。

 

抗生物素蛋白制劑每毫克蛋白質結合 15.1 µg D-生物素,相當于每摩爾蛋白質結合 摩爾生物素。生物素的解離常數約為 10 -15 M, 比典型的抗原-抗體相互作用高約 10 3 -10 6倍(Green 1963a 和 Nardone等人。1998 年)。生物素-抗生物素蛋白復合物依賴于介質離子強度,但在較寬的 pH 范圍內和對熱相對穩定。

 

bi要實現游離生物素的可逆或不可逆變性。pH 1.5 的氯化胍 (6-8 M) 和 120°的高壓滅菌 (15 分鐘是充分解離條件的示例 (Green 1970a, b)

 

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Worthington公司抗生物素蛋白的應用說明:

1.生物素功能研究

2.生物素是輔酶的酶的研究

3.用于親和純化的抗生物素蛋白或抗生物素蛋白亞基(Berger 和 Wood 1975,以及 Green 和 Toms 1973

4.體內靶向實體瘤

 

Worthington公司抗生物素蛋白參考文獻(部分):

Eakin, R., Snell, E., and Williams, R.: A Constituent of Raw Egg White Capable of Inactivating Biotin in Vitro, J Biol Chem 136, 801, 1940

Eakin, R., Snell, E., and Williams, R.: The Concentration and Assay of Avidin, the Injury-producing Protein in Raw Egg White, J Biol Chem 140, 535, 1941

Finn, F., Titus, G., Montibeller, J., and Hofman, K.: Hormone-Receptor Studies with Avidin and Biotinylinsulin-Avidin Complexes , J Biol Chem 255, 5742, 1980

Fraenkel-Conrat, H., Snell, N., and Ducay, E.: Avidin. I. Isolation and Characterization of the Protein and Nucleic Acid , Arch Biochem Biophys 39, 80, 1952

 

Worthington公司專注于生物技術和生命科學研究,診斷,生物制藥和生物加工應用的高質量純化酶,蛋白質,核酸和試劑盒。艾美捷科技是Worthington公司的中國代理商,為科研工作者提供優質的產品與服務。


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