簡介：目前，世界上大多數庫存的生物柴油來自于植物油或動物脂肪。雖然這些來源比較便宜和方便，但它們與糧食生產的資源有競爭。目前的研究涉及從不與糧食生產產生競爭的植物中尋找非食用來源的甘油三酯。一個有前途的來源是在生物反應器中控制養殖的海藻，其生長速度和所含油量與陸生作物相比都比較高。藻類和海洋生物油潛在的問題是其中含有較高濃度的多元不飽和脂肪酸 (PUFA)。轉化成生物柴油燃料后，多元不飽和脂肪酸甲酯表現出較低的氧化穩定性和較高的自聚率。如果生物柴油中 PUFA FAME 含量過高，這些性質將導致發動機中產生污垢和使燃油管或過濾器堵塞。

為了保證良好的藻類生物柴油的質量，歐洲標準化委員會 (CEN) 開發了一種 GC 分析方法來檢測生物柴油中發現的四個主要的多元不飽和脂肪酸甲酯的含量（表 1）。方法命名為 EN 15779 [1]。本應用簡報介紹了使用這種方法分析藻油所得的 B100 生物柴油時，Agilent 7890A GC氣相色譜系統的配置和分析性能。

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實驗根據 EN 15779 的方法對 Agilent 7890A GC 進行配置和設定儀器條件。詳見表 2 和表 3。配制 1.0 mg/mL 二十三酸甲酯 (C23:0) 的正庚烷溶液作為內標溶液。配制 0.1 mg/mL 的四種多元不飽和脂肪酸甲酯（見表 1）的正庚烷溶液，其中含 1.0 mg/mL 的內標(C23:0)。該標準溶液用于確定每個多元不飽和脂肪酸甲酯和內標C23:0 的保留時間。用于測試的樣品為兩個藻類 B100 生物柴油樣品。每個樣品取出 100 mg 加入 2 mL 自動進樣器樣品瓶中，再加入1.0 mL C23:0 內標溶液，然后混合。樣品制備完成后重復上樣進行分析，以確定分析的重復性。

結果與討論圖 1 是 PUFA FAME 參考標樣在 EN 15779 GC 條件下運行后得到的色譜圖。每個色譜峰的保留時間分別在色譜圖上標出。這些保留時間用來識別生物柴油樣品中發現的四個多不飽和脂肪酸甲酯。兩個藻類生物柴油樣品的 GC 分析結果如圖 2 所示。兩個樣品中FAME 的組成非常相似，但樣品 1 中 PUFA FAME 的含量較高。采用 EN 15779 方法中每個多不飽和脂肪酸甲酯的理論響應因子對多元不飽和脂肪酸甲酯進行定量分析。通過使用添加到每個樣品中的內標 C23:0 FAME 的探測器響應對上述響應因子進行校正。此過程有助于提高最終結果的準確性。對每個 PUFA FAME 的重量百分含量進行了計算，樣品中的總 PUFA FAME 含量由各脂肪酸甲酯的含量之和得到。表 4 是重復分析兩種藻類生物柴油樣品的分析結果。每個樣品的分析精度通過計算重復運行的重復性 (r) 確定。重復性是指單一操作者在同一儀器上、短時間內（通常是指同一天）重復運行樣品分析結果之間的差異。EN 15779 方法僅給出了總PUFA FAME 的分析結果重復性指標。表 4 結果表明使用 Agilent7890A GC 系統時，兩個樣品分析結果的重復性都超過了 EN15779 的指標要求。

結論海藻或海洋生物油制成的生物柴油中的 PUFA FAME 分析可以很容易地使用 EN 方法 15779 在 Agilent 7890A GC 系統上實現。根據該方法中的要求，PUFA FAME 含量的校準和報告均可以采用安捷倫化學工作站軟件的標準工具完成。分析兩種藻類生物柴油樣品的結果表明，7890A GC 系統提供的分析結果，其精度符合 EN15779 的方法要求。