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基質膠——3D類器官培養成功的關鍵

來源:翌圣生物科技(上海)股份有限公司   2022年09月22日 17:38  
基質膠——3D類器官培養成功的關鍵

隨著疫情的持續影響,多國都開啟了保護主義模式,全球化進程戛然而止,作為21世紀前景的生命科學也受到了相關沖擊。在今年4~6月份,基質膠在全國大面積缺貨,導致很多企業無法按時完成產品和服務交付、科研工作者科研成果不能及時發表以及即將畢業的莘莘學子們的畢業論文無法按時完成實驗導致畢業進程受到很大的影響。在中美脫鉤的影響下,如果出現關鍵性生物原料出現如芯片一樣的卡脖子問題,將會對中國的生命科學產業和研究造成嚴重沖擊,這是我們不想看到的,因此加速國產替代是個必然趨勢和過程。


基質膠(Basement membrane matrix)是從富含胞外基質蛋白EHS小鼠腫瘤中提取出的可溶性基底膜制備物,其主要成分由層粘連蛋白,Ⅳ型膠原,硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPG)和巢蛋白等組成,還包含生長因子如TGF-beta、EGF、IGF、FGF、組織纖溶酶原激活物和EHS腫瘤自身含有的其他生長因子。在1980年代中期由丹麥的 J. Engelbreth-Holm和Richard Swarm二者分別發現并具體描述基質膠[1],其主要生產過程是用鹽水提取/洗滌腫瘤勻漿后可溶性蛋白質,再用溶劑萃取產物中不溶性復合物,在低溫下使用緩沖液進行透析后獲得無色到淡黃色溶液。



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表:基質膠組分【1】



基質膠為組織和細胞提供支撐、抗拉強度和支架支撐,也可以作為細胞粘附和運動的三維亞結構以及生長因子、趨化因子和細胞因子的儲存庫,同時可作為細胞形態發生和分化的信號等。翌圣生物開發生產的Ceturegel™基質膠不含LDEV(乳酸脫氫酶增高病毒),超低內毒素含量,并全部經過支原體檢測保證無支原體污染,包括基本濃度、高濃度、低生長因子等不同類型基質膠。 


基質膠應用方向



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產品特點




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產品種類


  • 基本濃度(8-12mg/mL)

  • 低生長因子

  •  高濃度(≥18 mg/mL)

  • 干細胞專用

  • 類器官專用


應用驗證



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圖:細胞侵襲后經結晶紫染色的結果


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圖.血管生成明場和熒光結果



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圖.細胞3D培養4d后結果




Q&A

拿到的基質膠有色差的變化(淡黃色到深紅色)是什么原因?

對于含酚紅的基質膠主要原因是由于酚紅和碳酸氫鹽與CO2作用引起的,但是與5%CO2平衡后色差即會減少。凍融后,輕輕搖晃試劑瓶使基質膠分散均勻。

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基質膠的操作要注意哪些事項?

所有操作需在無菌環境下進行,應使用預冷的器材以保證基質膠正常操作。

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基質膠如何分裝凍存使用?

可將凍融后的Ceturegel™基質膠分裝在多個凍存管,凍存管需預冷,分裝后迅速冷凍并保存,避免多次凍融。

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[1] Kleinman H K , Martin G R . Matrigel: basement membrane matrix with biological activity.[C]// Seminars in Cancer Biology. 2005.





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