CRM-GTX2&3-d 魚(yú)腥藻毒素-2 和-3溶液的研制

從培養(yǎng)的塔瑪亞歷山大藻(Alexandriumtamarense)中提取N-硫脲基-2和-3，并化學(xué)轉(zhuǎn)化成GTX2和GTX3混合物。純化后的GTX2&3在真空中干燥，溶于過(guò)濾后的0.5mm HCI中，形成原液。用500 MHz質(zhì)子核磁共振(NMR)、LC-OX-FLD[3](圖1)、LC-MS/MS[4](圖2和圖3)、毛細(xì)管電泳-紫外檢測(cè)(CE-UVD)[5]和液相色譜-化學(xué)發(fā)光光譜(LC-CLND)[6]對(duì)毒素的純度進(jìn)行了檢測(cè)。

CRM-GTX2&3-d 溶液在過(guò)濾 (0.2 um) 中制備并在 pH 3.4 下脫氣 0.5 mM HCl，然后分配到預(yù)先填充有氬氣的琥珀色安瓿中，然后立即將其火焰密封。每個(gè)安瓿含有大約 0.5 mL 溶液 .

分析方法與價(jià)值分配

CRM-GTX2&3-d(表1)的標(biāo)準(zhǔn)值是基于NRC使用兩種分析方法得到的結(jié)果：1 HNMR(QNMR)，以鄰苯二甲酸氫鉀(NISTSRM 84I)為校準(zhǔn)劑的準(zhǔn)確溶液和以咖啡.因(NMIA M724c)為準(zhǔn)確溶液的LC-CLND。

CRM-GTX283-d中存在低水平的脫阿米諾酰弓形毒素-2(DcGTX2)、脫羧阿米諾酰弓形毒素-3(DcGTX3)、弓形毒素-1(GTX1)和弓形毒素-4(GTX4)。信息值分配給byic-ox-FLD，并使用NRC CRMS對(duì)這些類似物進(jìn)行校準(zhǔn)(表2)。

同質(zhì)性

代表數(shù)量的CRM-GTX2&3-d安瓿是從整個(gè)填充系列和GTX2&3濃度測(cè)定的LC-OX-FLD。數(shù)據(jù)用方差分析進(jìn)行評(píng)估。

穩(wěn)定度

研究表明，儲(chǔ)存在+4°C的密封安瓿中的GTX2&3溶液具有良好的長(zhǎng)期穩(wěn)定性，在一年內(nèi)沒(méi)有觀察到可檢測(cè)到的分解現(xiàn)象。溶液也是穩(wěn)定的，當(dāng)儲(chǔ)存在冰箱(-12°℃或更低)。測(cè)定結(jié)果表明，GTX283在室溫下具有良好的穩(wěn)定性，在不確定度范圍內(nèi)未觀察到一個(gè)月的分解現(xiàn)象(LC-MS，<1%RSD；n=6)。

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