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高壓滅菌鍋的滅菌步驟：
1、準備。將高壓滅菌鍋放在2000瓦電爐上，或放在有足夠火力的煤氣灶、煤爐上，向鍋內加水至水位標記線為止。將準備滅菌的培養基及空玻璃器皿用牛皮紙包好，裝入鍋內套層中，物品放置不宜過多，過擠，鍋內應留出三分之一空間。然后蓋嚴鍋蓋，采用對角式均勻擰緊鍋蓋上的螺旋，關閉鍋蓋上的氣閥。
2、加熱。點燃熱源，開始加熱。當鍋蓋上的壓力表達到0.5kg/c㎡時，打開放氣閥，排凈鍋內冷空氣，直到壓力表回降到“0”時，關閉氣閥，繼續加熱。當壓力表上升到所需壓力時(一般為1kg/c㎡)，開始計算滅菌時間。此時應適當關小熱源，不斷調節熱源大小，使壓力始終維持在所需數值上，達到保壓時間后，停止加熱，使高壓滅菌鍋內壓力自然下降。
3、結束。待壓力表降至“0”時，擰松螺旋，半開鍋蓋，用鍋內余熱烘干蓋紙，10分鐘后取出滅菌物品。
高壓滅菌鍋的注意事項：
1、鍋外水壺水位線的檢查，要使其介于最高線和低線的中間位置偏下為宜。以免在滅菌過程中有過熱的水和水蒸氣溢出，造成危險。
2、每次打開高壓滅菌鍋前要確保溫度在80℃以下和壓強為0。
3、滅菌用水必須用RO水/單蒸水，以免滅菌鍋內積水垢。
4、在拿出籃子時要盡量保持籃子清潔，以防被污染。
5、如在滅菌過程出現問題，按STOP鍵，轉到制冷系統，中止操作。
6、滅菌過后要檢查好電源是否斷開，整理好方可離開。
7、如隔1個月左右不用，需將鍋內水排掉，清洗滅菌鍋。
8、在滅菌過程中，應注意排凈鍋內冷空氣，鍋內冷空氣如排放不凈，會影響滅菌效果，達不到*滅菌的目的。
9、由于高壓蒸汽滅菌時，要使用溫度高達120℃、兩個大氣壓的過熱蒸汽，操作時，必須嚴格按照操作規程操作，否則容易發生意外事故。
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