貼壁法:
器械
顯微器械:眼科剪一把,直彎眼科鑷各一把,細結鑷一把,手術刀一把,針頭諾干
殺老鼠器械:手術剪一把,大鑷子一把,彎眼科鑷一把,組織鉗一把,50ml燒杯一個(錫紙包好)
另外:10ml離心管兩個,培養皿兩個,10ml的瓶子三個,小濾器兩個,硅膠板一塊,培養瓶蓋子諾干
貳。試劑
D-HANKS液250ml,雙抗2ml(青霉素16萬U/ml鏈霉素15萬U/ml)。FBS和含20%FBS的DMEM
叁。步驟
1. 取大鼠,稱重,水合氯醛0。3ml/100g腹腔麻醉
2. 綁好大鼠,先剪開腹腔,剪斷腹部大動脈放血,后剪開胸腔,取肺
3. 放入燒杯,后移入超凈臺,置于冰盒上。以后的操作皆在冰盒上操作
4. 倒入已加雙抗的D-HANKS,清洗肺部,扯掉食管,剪掉心臟
5. 用針頭將肺固定在硅膠板上,硅膠板置于培養皿里
6. 用鑷子將肺的內外膜除去,只剩下平滑肌
7. 用眼科剪將肺部剪成1-2mm的小碎塊
8。在培養瓶中加入一到兩滴的FBS,輕搖培養瓶,使血清鋪滿瓶底。
9。用眼科剪將碎塊放進瓶中,后用滴管將碎塊在瓶里鋪均勻。
10。將瓶底朝上,放入培養箱中
11。四個小時后,將瓶子翻回
這樣處理后,一般五天內不用看它,第六天開始,可以加入含20%FBS的DMEM
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安培生物科技有限公司介紹:
安培生物堅持為生命科學研究、活體動物轉染、大規模生物生產、基因和細胞治療領域客戶,提供*細胞體內可代謝的核酸轉染試劑;inviCELL™Platelet lysate無動物血清產品旨在支持廣泛的細胞擴增和生產,包括培養間充質干細胞和多種免疫細胞系等,為制藥公司或者生物技術公司提供無血清細胞培養規模生產服務;提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細胞培養可分解3D基質膠產品;提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、對細胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產品。安培生物專注為生物醫藥領域提供優質的產品和技術服務,努力發展為基因治療、細胞治療的生物科技企業
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