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尼康光學顯微鏡上的放大倍數為100倍的就是油鏡，在使用時需要在玻片上滴加香柏油才能看清楚鏡下的物象。之所以使用油鏡時在玻片上滴加香柏油。這是因為油鏡的放大倍數較高，而透鏡很小，光線通過不同密度的介質物體（玻片-空氣-透鏡）時，部分光線會發生折射而散失，進入鏡筒的光線少，視野較暗，物體觀察不清。如在透鏡與玻片之間滴加和玻璃折射率（n=1.52）相仿的香柏油（n=1.515），則使進入油鏡的光線增多，視野亮度增強，物象清晰。實驗時微生物一般較小，用油鏡觀察，放大倍數大，觀察得較為清晰。
油鏡的一般使用方法如下所述：
1.在使用油鏡之前，必須先經低、高倍鏡觀察，然后將需進一步放大的部分移到視野的中心。
2.將集光器上升到高位置，光圈開到大。
3.轉動轉換器，使高倍鏡頭離開通光孔，在需觀察部位的玻片上滴加一滴香柏油，然后慢慢轉動油鏡，在轉換油鏡時，從側面水平注視鏡頭與玻片的距離，使鏡頭浸入油中而又不以壓破載玻片為宜。
4.用左眼觀察目鏡，并慢慢轉動細調節器至物象清晰為止。如果不出現物象或者目標不理想要重找，在加油區之外重找時應按：低倍-高倍-油鏡程序。在加油區內重找應按：低倍-油鏡程序，不得經高倍鏡，以免油沾污鏡頭。
5.油鏡使用完畢，先用擦鏡紙沾少許二甲苯將鏡頭上和標本上的香柏油擦去，然后再用干擦鏡紙擦干凈。
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