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根據流動相和固定相相對極性不同，液相色譜分為正相色譜和反相色譜。流動相極性大于固定相極性的情況，稱為反相色譜。非極性鍵合相色譜可作反相色譜。
反相色譜柱是一種用于分離分析各種物質的高效液相色譜分離柱。反相色譜柱具有高效、靈敏和選擇性好等優點，廣泛應用于化工、醫藥、食品等工業領域以及環保監測等領域。
使用方法：
1.先用正己烷-乙腈（99：1）以0.5ml/min的流速沖10倍柱體積，再依次以相同的流速相同的用量用氯、異丙醇、甲醇、甲醇-水（50：50）沖柱子；
2.以0.5ml/min的流速用30倍柱體積的pH11.0的氫氧化鈉（LUNA）水溶液沖柱子（注意pH值切不可超過11.0），立即用水（0.5ml/min的流速，30倍柱體積）沖洗，再換成流動相；
3.配制流動相時，應各組分分別量取，比例較小的組分要精密量取，需調pH值時要精密到0.1；
4.反相條件下使用時，要特別注意控制pH值范圍，pH值越低越有發生水解的危險，流動相中水的比例越高當然也越有發生水解的危險。理想的pH范圍在pH3.0-7.0；
5.如果要使用的流動相中還含有緩沖鹽類，建議在用分析流動相之前，先用不含緩沖鹽的同比例流動相過渡，這樣可避免緩沖鹽在分析柱內的析出。
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