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| 步驟 | GB 5009.111-2016 傳統SPE柱法凈化（嘔吐毒素） | GB 5009.22-2016 黃曲霉毒素免疫親和柱 | GB 5009.96-2016 赭曲霉毒素A免疫親和柱法 | FaTEx 多真菌毒素專用SPE柱法 |
| 1 | 稱取2g樣品，于50mL離心管中 | 稱取5g樣品，于50mL離心管中 | 稱取25g樣品，加入5g氯化鈉 | 1、稱取2g樣品，于50mL離心管中 |
| 2 | 加內標溶液，靜置30min | 加內標溶液，靜置30min | 用提取液Ⅰ定容到100mL，混勻 | 2、加入 12mL 70%酸化乙腈溶液 |
| 3 | 加入20mL乙腈-水溶液，渦旋混勻 | 加入20mL乙腈-水溶液，渦旋混勻 | 高速均質2min | 3、高速振蕩30min |
| 4 | 超聲或渦旋振蕩20min | 超聲或渦旋振蕩20min | 用定性濾紙過濾 | 4、離心5min，取5mL上清液到FaTEx SPE柱內 |
| 5 | 離心5min，取5mL上清液 | 離心10min，取4mL上清液 | 移取10mL濾液于50mL容量瓶 | 5、以每秒1滴過柱，收集濾液 |
| 6 | 加入10mL乙腈飽和正己烷溶液 | 加入46mL 1% Trition X-100的PBS，混勻得到樣液 | 加水定容至刻度，混勻 | 6、取1.2mL濾液濃縮至近干 |
| 7 | 渦旋2min | 將低溫保存的免疫親和柱恢復至室溫，將原有液體流盡 | 經玻璃纖維濾紙過濾澄清，收集濾液A于容器 | 7、以1mL50%乙腈-水溶液回溶 |
| 8 | 離心2min，棄去正己烷層 | 將上述樣液以1-3mL/min的速度通過免疫親和柱 | 移取10mL濾液A，以每秒1滴通過免疫親和柱 | 8、過濾膜，上機到LC-MS/MS分析 |
| 9 | 氮吹近干，加入4mL水復溶為溶液A | 用20mL水淋洗免疫親和柱 | 用10mLPBS緩沖液通過親合柱 | |
| 10 | 用3mL甲醇和3mL水活化平衡SPE柱 | 水滴完后，抽干親和柱 | 用10mL水淋洗親和柱 | |
| 11 | 將4mL溶液A上柱，每秒1-2滴 | 加入2mL甲醇洗脫親和柱，1-3mL/min的速度 | 棄去流出液，抽干親和柱 | |
| 12 | 用3mL誰淋洗SPE柱 | 再次抽干親和柱 | 以5mL甲醇洗脫2次，收集洗脫液 | |
| 13 | 用1mL5%甲醇-水溶液淋洗SPE柱 | 收集全部洗脫液到試管中，氮吹至近干 | 氮吹近干 | |
| 14 | 抽干SPE柱，用4mL甲醇洗脫 | 用1mL初始流動相復溶 | 以1mL乙腈-水溶液復溶 | |
| 15 | 收集全部洗脫液后，氮吹近干 | 過濾膜，上機到LC-MS/MS分析 | 過濾膜，上機到LC-MS/MS分析 | |
| 16 | 用1mL初始流動相復溶 | |||
| 17 | 過濾膜，上機到LC-MS/MS分析 | |||
| 小結 | GB 5009.111-2016 傳統SPE柱法凈化（嘔吐毒素） | GB 5009.22-2016 黃曲霉毒素免疫親和柱 | GB 5009.96-2016 赭曲霉毒素A 免疫親和柱法 | FaTEx 多真菌毒素專用SPE柱法 |
| 目標物 | 嘔吐毒素（1種） | 黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2（4種） | 赭曲霉毒素A（1種） | 黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2，赭曲霉毒素A，嘔吐毒素，玉米赤霉烯酮，伏馬毒素B1、B2，T-2毒素，HT-2毒素（11種） |
| 基質 類型 | 谷類及制品、醬及制品 | 谷類及制品、豆類及制品、堅果及籽、油脂及制品、調味品等 | 玉米、小麥等糧食 | 谷類、米類、玉米、花生、花生醬 |
| 前處理 | 傳統嘔吐毒素SPE柱法凈化法 1、一次凈化測試 1種毒素2、液液萃取操作，多做一次溶劑轉換 3、傳統SPE柱需要活化、淋洗和洗脫 | 免疫親和柱法前處理 1、一次凈化測試 4種毒素2、低溫儲運，恢復常溫后使用 3、需要淋洗、抽干和洗脫 | 免疫親和柱法前處理 1、一次凈化測試 1種毒素2、低溫儲運，恢復常溫后使用 3、需要淋洗、抽干和洗脫 | FaTEx 真菌毒素專用SPE柱 1、一次凈化測試 11種毒素（包括但不限于）2、常溫使用 3、操作步驟簡化 |
| 效率 | 5-6小時/每批20個樣品 | 4小時/每批20個樣品 | 4小時/每批20個樣品 | 1小時/每批20個樣品 |
| 參考資料： | ||||
| 1、GB 5009.111-2016 食品安全國家標準 食品中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇及其乙酰化衍生物的測定 | ||||
| 2、GB 5009.22-2016 食品安全國家標準 食品中黃曲霉毒素B族和G族的測定 | ||||
| 3、GB 5009.96-2016 食品安全國家標準 食品中赭曲霉毒素A的測定 | ||||
| 4、以FaTEx-gen快速凈化萃取套組搭配液相層析串聯質譜分析谷類樣體中之多重霉菌毒素應用方案 | ||||
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