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一文看懂4T1-LUC(小鼠乳腺癌細胞)

來源:廈門逸漠生物科技有限公司   2022年12月14日 14:22  
  4T1-LUC(小鼠乳腺癌細胞),引進ATCC細胞庫,確保細胞準確,提供STR鑒定報告,出庫附COA質檢報告,確保無支原體、細菌、酵母和真菌等。
 
  4T1-LUC(小鼠乳腺癌細胞)培養操作:
 
  1)復蘇細胞:將含有1 mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養基的培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入6 cm皿中,加入約4 mL培養基,培養過夜)。下一天換液并檢查細胞密度。
 
  2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
 
  a、棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
 
  b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)于培養瓶中,使消化液浸潤所有細胞,將培養瓶置于37℃培養箱中消化1-2 min(視細胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加2-3ml*培養基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養液后吹勻。
 
  c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養基的新皿中或者瓶中,置于培養箱中培養。
 
  3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
 
  a、收集細胞,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數。
 
  b、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。
 
  c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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