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原理
直接從生物體內(nèi)獲取組織細(xì)胞進(jìn)行的首-次培養(yǎng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。原代培養(yǎng)是建立各種細(xì)胞系的第一步，是從事培養(yǎng)工作的人員應(yīng)熟悉和掌握的最基本的技術(shù)。根據(jù)培養(yǎng)方法不同分為組織塊培養(yǎng)法和單層細(xì)胞培養(yǎng)法。
材料與儀器
小鼠
DMEM DMEM 胰酶 PBS
飯盒 紗布 小剪子 小鑷子 大鑷子 大燒杯 平皿 研磨玻片 濾網(wǎng) 離心管 6 孔培養(yǎng)板 吸管 移液管 手套 微量加樣器
步驟
一、實(shí)驗(yàn)步驟
注意事項(xiàng)
1. 自取材開(kāi)始，保持所有組織細(xì)胞處于無(wú)菌條件。細(xì)胞計(jì)數(shù)可在有菌環(huán)境中進(jìn)行。
2. 在超凈臺(tái)中，組織細(xì)胞、培養(yǎng)液等不能暴露過(guò)久，以免溶液蒸發(fā)。
3. 凡在超凈臺(tái)外操作的步驟，各器皿需用蓋子或橡皮塞蓋住，以防止細(xì)菌落入。
4. 操作前要洗手，進(jìn)入超凈工作臺(tái)后要用75％酒精或0.2％新潔爾滅擦拭手。試劑瓶口也要擦拭。
5. 點(diǎn)燃酒精燈，操作在火焰附近進(jìn)行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼。金屬器械燒灼時(shí)間不能太長(zhǎng)，以免退火，且冷卻后才能夾取組織。吸取過(guò)營(yíng)養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。
6. 操作動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動(dòng)，增加污染機(jī)會(huì)。
7. 不能用手觸及消毒器皿的工作部分，工作臺(tái)面上的用品擺放要布局合理。
8. 瓶子開(kāi)口后要盡量保持45°斜位。
9. 吸溶液的吸管等不能混用。
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安培生物科技有限公司介紹：
安培生物堅(jiān)持為生命科學(xué)研究、活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶，提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑；inviCELL™Platelet lysate無(wú)動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn)，包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等，為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù)；提供以植物生物為平臺(tái)基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品；提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)，努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè)。
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