流式細胞術是一種對溶液中單個細胞或顆粒進行快速、多參數分析的技術。流式細胞儀利用激光作為光源，照射在細胞上，產生散射光和熒光信號，由檢測器如光電二極管或光電倍增管讀取。之后，這些信號被轉換成電子信號，由計算機進行分析，并寫入標準格式(.fcs)數據文件。另外，細胞群可以根據其熒光或散射光的特性進行分析或分選。

用于流式細胞術的儀器在過去的幾十年里不斷“進化”著，以滿足越來越多的科研與臨床應用需求。本文將為大家簡單介紹幾種流式細胞儀。

傳統流式細胞儀

傳統的流式細胞儀由液流、光學和電子（檢測分析）三個系統組成。

液流系統

液流系統主要由鞘液(通常是一種緩沖鹽水溶液)構成。在一定壓力下，鞘液將細胞或顆粒聚焦在一條直線，并將其輸送到激光攔截點。

光學系統

學系統由激發光 (激光器)和收集光 (光電倍增管或PMTs和光電二極管)組成，產生用于分析樣品的散射光和熒光信號。一系列的雙色向濾光片可引導熒光到特定的探測器，以便每一個單獨的熒光色素可以被檢測和測量。更具體地說，雙色向濾光片只允許波長較短或較長的光通過，并以一定角度反射不能通過的光。例如，450雙色向長通濾光片(DLP)讓波長大于450 nm的光通過濾光片，并以一定角度反射較短波長的光，發送到另一個探測器。帶通濾光片只允許一定波長范圍內的熒光通過。例如，450/50帶通濾光片只允許波長為450 +/- 25 nm的熒光通過。

電子系統

電子系統將探測器發出的信號轉換成可以被計算機讀取的數字信號。

常見的多激光系統通常有20個參數(FSC, SSC和18個熒光探測器)。目前，一些新的儀器正在引入5個或更多的激光器，并設置30-50個參數，但這并不常見。傳統流式細胞儀使用的常見的激光是488 nm(藍色)、405nm(紫色)、532nm(綠色)、552nm(綠色)、561 nm(綠)、640 nm(紅色)和355 nm(紫外線)，還有一些不常見的激光可用于特定用途。此外，還有一些儀器已經用電子崩光電二極管(APD)取代光電倍增管(PMT)用于熒光檢測，目的是提高檢測的靈敏度。

聲波聚焦流式細胞儀

聲波聚焦流式細胞儀可以使用超聲波更好地將細胞聚焦于一條直線，進行激光照射。即使在較高的進樣速度下，聲波聚焦技術也可以精確地將細胞定位在液流的中心，因此細胞信號的變異系數較小，數據質量更高。作為對比，同樣在高進樣速度下，傳統的流體動力學聚焦由于鞘液壓力相對變小，樣本流的中心部分變寬，導致信號變異系數增大、數據質量下降。此外，聲波聚焦的方式允許更高的上樣量，并能夠減少樣品堵塞。聲波聚焦流式細胞儀可以利用多達4種激光和14個熒光通道對樣本進行檢測。

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