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根系活力的測定

來源:深圳市安培生物科技有限公司   2023年01月30日 15:53  

原理

根據植物礦質吸收的理論,認為植物對溶質的最初吸收具有吸附的特性,并假定這時在根系表面均勻地復蓋了一層吸附物質的單分子層。因此能根據根系的某種物質的吸附量來測定根的吸收面積。常用甲烯藍作為被吸附物質,它的被吸附量可以根據溶液濃度的變化用比色法準確地測出。已知1毫克甲烯藍成單分子層時占用1.1平方米的面積。據此即可求出根系的總吸收面積。當根系在甲烯藍溶液中已達到吸附飽和而仍留在溶液中時,根系的活躍部分能把原來的物質吸收到細胞中去,因而繼續吸附甲烯藍。而后根據吸附量求出活躍吸收面積,可作為根系活力指標。

材料與儀器

721分光光度計 小磁杯 量筒 刻度吸管

步驟

一、材料與設備

1. 植物材料:最好用水培植物的根,如用砂培植物的根,在沖洗石英砂時應十分小心,以免將根系折斷或傷害。

2. 儀器與用具:

(1)581G型光電比色計或721分光光度計1臺;(2)小磁杯或小燒杯三只;(3)50或100毫升量筒一個(依根系大小確定);(4)刻度吸管,1ml 1支,10ml 1支;(5)試管(15×150毫升)10支;(6)量瓶,100ml 1個,1000ml 1個;(7)吸水紙適量;(8)試管架1個。

3. 試劑:

(1)0.0002N甲烯藍溶液。

精確稱取64mg甲烯藍在燒杯中加水溶解,轉入1000ml量瓶中,加水定容,搖勻即成。此溶液每ml含有甲烯藍0.064mg。

(2)每毫升含0.010毫克的甲烯藍溶液。

用刻度吸管吸取0.0002N甲烯藍15.6毫升放入100毫升量瓶中,加水至刻度,搖均即成。

二、 操作步驟

(1)甲烯藍溶液標準曲線的制作:

取試管7支,用玻璃鉛筆編號,按下表次序加入各溶液,即成甲烯藍系列標準液:

以第一管(水)為對照在光度計下比色,讀出光密度(波長660毫微米),以甲烯藍濃度為橫坐標,光密度為縱坐標繪成標準曲線。

(2)取根系(待測植物根系)用排水法在量杯或量筒中測定其根系體積。

(3)把0.0002N甲烯藍溶液(每毫升溶液中含有0.064毫克甲烯藍)分別倒在三個編號磁杯里(或燒杯里)磁杯中溶液量約10倍于根的體積,準備記下每杯的溶液用量。

(4)取根系,用吸水紙小心吸干數次,慎勿傷根,然后順序地浸入盛有甲烯藍溶液的磁杯中,在每杯中浸1.5分鐘。注意每次取出時都要使甲烯藍溶液從根上流回原磁杯中。

(5)從三個磁杯中各取1ml溶液加入試管,分別稀釋至10倍,用電光比色計測得其光密度,查標準曲線,求出每杯浸入根系后溶液中剩下的甲烯藍毫克數。

測定根系吸收面積記載表

 

(6)把結果記錄下來,并依據下式求出根的吸收面積:

C--溶液原來濃度(mg/ml)      C'--浸根后的濃度(mg/ml)

V--溶液量(ml)         1,2,3為編號(磁杯)


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