miRNA 是較小(約 22 bp)的高度保守非編碼 RNA,在每種細胞類型中進行內源性表達。它通過堿基對互補使靶轉錄本沉默,從而起到基因表達關鍵調控因子的作用。許多研究表明miRNAs的表達譜與疾病息息相關,且可穩定的存在于多種體液(包括血液、唾液和尿液),出于這些原因,miRNA 作為非侵入性生物標志物成為了包括癌癥在內幾乎所有人類疾病的理想候選生物標志物。
乳腺癌是女性最常見的癌癥之一,醫學技術發展到今天,可以說很多乳腺癌都可以被治愈,但三陰性乳腺癌患者的治療和生存不容樂觀。很難治療,因此迫切需要找到相關的生物標志物來實現對該疾病的早期檢測。研究表明5 個 miRNA 的表達譜(miR-92a-3p、miR-342-3p、miR-16、miR-21 和 miR-199a-5p)可以有效區分 TNBC 和非 TNBC,有望在將來用于 TNBC 的診斷。
基于這些前期研究,海南醫學院呂卓璇研究員聯合碧芯生物共同開發了高通量檢測三陰性乳腺癌相關miRNAs表達的方法。其原理主要是將等溫擴增中的滾環擴增技術與懸浮芯片(磁性熒光編碼微球)相結合,具體研究步驟如圖1所示,首先將與TNBC相關的miRNA反轉成cDNA,然后再通過其對應的連接引物連接成環;連接再不同熒光編碼微球上的特異性的引物會與DNA環互補配對,對成環產物進行滾環擴增;最后通過流式細胞儀檢測編碼微球和擴增產物(采用熒光標記的dUTP)的熒光標記信號確定待測RNA樣本的miRNA的類別和表達水平。
該篇文章“High-throughput quantitative detection of triple-negative breast cancer-associated expressed miRNAs by rolling circle amplification on fluorescence-encoded microspheres” 近期發表于在Chinese Chemical Letters (CCL)(2022年中科院分區1區, IF= 8.455)。
碧芯生物是一家專業從事低吸附磁性熒光編碼微球自主研發以及流式細胞法檢測多重蛋白試劑盒開發的生物高科技企業。公司是由在生物、材料、醫學等多學科領域有著扎實研究基礎和豐富實驗經驗的博士團隊組成。現已開發70種低吸附磁性熒光編碼微球,并在此基礎上進一步研發出可靈活組合的多細胞因子檢測試劑盒,包括小鼠多細胞因子檢測試劑盒(IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、IL-12p70、IL-1β,MCP-1、IFN-γ、TNF-α)和人類多細胞因子檢測試劑盒(IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-8、IL-6、IL-10、IL-12p70、IL-17A、TNF-α、IFN-γ、IFN-α2)。這些細胞因子的檢測可根據實際需要進行自組合搭配,滿足客戶多樣化應用場景的需求。
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