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C666-1人鼻咽癌細(xì)胞株容易形成空泡，不傳代的老細(xì)胞,在顯微鏡下可見到有些細(xì)胞的胞漿突出,然后脫落成死細(xì)胞,還有多核巨細(xì)胞。在這二株細(xì)胞,特別是CNF細(xì)胞的單層或多層細(xì)胞上有很多圓形細(xì)胞,核大,漿少。在培養(yǎng)液中也有大量圓的脫落細(xì)胞。將培養(yǎng)液中的懸浮細(xì)胞接種于培養(yǎng)瓶,細(xì)胞仍能貼瓶,生長出原來的上皮樣細(xì)胞或梭形細(xì)胞。將CNE,CNF細(xì)胞和這二株細(xì)胞的脫落細(xì)胞培養(yǎng)成單層后,不傳代,每周換液二次,繼續(xù)培養(yǎng)7個(gè)月,未能得到類淋巴母細(xì)胞株，在培養(yǎng)過程中未見到腫瘤組織培養(yǎng)中常見到的成纖維細(xì)胞生長。
C666-1人鼻咽癌細(xì)胞株的操作方法：
1.貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37°C水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，379C孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于園形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基，置37°C溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2.懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min,棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37°C溫箱培養(yǎng)。
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