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配制Feed4補料培養基必須使用高質量的水，如石英玻璃蒸餾器經三次蒸餾或超純水凈化裝置制備的水。因為其缺乏了血清中天然成分中和毒素、保護細胞的大分子，既便水中的有毒物質含量甚微，也可能對細胞產生致死性損害。這是無血清培養能否成功的關鍵因素之一。
下面咱們來了解下Feed4補料培養基的使用方法：
1、稱取本品52.2g，加入蒸餾水或去離子水1L，攪拌加熱煮沸至溶解，冷至50℃左右，傾注平皿，待凝固后備用。
2、水樣抽濾。水樣濾完后，再抽氣約5秒，關上閥門，取下濾器，用滅菌鑷子夾取濾膜邊緣部分，移放在該物質上，濾膜截留面向上，濾膜應與其貼緊，兩者間不得留有氣泡。
3、然后將平皿倒置，放入44.5℃隔水式培養箱內培養22—24h。如果使用恒溫水浴，則需用塑料平皿，將皿蓋緊，或用防水膠帶貼封每個平皿，將其成疊封入塑料袋內，浸到44.5℃恒溫水浴里，培養22—26h。
4、觀察結果。類大腸菌群在此培養基上菌落為藍色，非糞性大腸菌群菌落為灰白色至奶油色。
那么在使用時需要注意些什么事項呢？
1、稱量脫水干粉培養基時避免粉塵揚起，應佩戴口罩操作以免吸入粉塵引起呼吸道系統不適。
2、凝膠培養基如在2～8℃下保存需與存放容器冷凝管保持一定距離以避免結冰，同時不要存放在冰箱或冷庫風扇直吹的位置以避免把平板吹干。產品多次在低溫與常溫之間變更會引起瓊脂的泌水，屬于正?，F象。使用前應平衡至室溫。
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