急性胰腺炎(Acute pancreatitis, AP)是臨床上常見(jiàn)的急腹癥，病因復(fù)雜，病死率達(dá)5%~10%，重癥AP死亡率高達(dá)20%~30%，目前發(fā)病機(jī)制尚未闡述，無(wú)特殊治療方式。目前活體AP動(dòng)物模型制作常用方法大致有胰管結(jié)扎法、十二指腸閉袢法、胰膽管穿刺注射法、胰腺被膜下注射法、胰膽管注射法結(jié)合靜脈輸注法、蛙皮素聯(lián)用脂多糖腹腔內(nèi)注射法等。

牛磺膽酸鈉（Taurocholic acid Sodium Salt）容易通過(guò)逆行灌注胰腺，模擬膽汁反流，損傷胰腺，誘導(dǎo)重癥急性胰腺炎（severe acute pancreatitis，SAP）。通過(guò)激活NF-κB途徑，引起肺損傷。逆行胰膽管灌注牛黃膽酸鈉是一種經(jīng)典的重癥急性胰腺炎的造模途徑。

圖1 牛磺膽酸鈉分子結(jié)構(gòu)(CAS .145-42-6）

牛磺膽酸鈉可以誘導(dǎo)大多數(shù)動(dòng)物發(fā)生AP，但是此類模型主要應(yīng)用于嚙齒類動(dòng)物（如大鼠和小鼠）。

牛磺膽酸鈉可誘導(dǎo)急性壞死胰腺炎，這種模型多伴有多器官功能衰竭，適用于研究AP的局部和全身并發(fā)癥，用于臨床膽汁反流性胰腺炎的發(fā)病機(jī)制及藥物治療療效的研究，可為研究SAP的靶向治療提供工具。

1、將動(dòng)物禁食過(guò)夜，并自由飲用新鮮自來(lái)水。通過(guò)腹腔注射10%氯醛脲（0.3mL/100g）進(jìn)行麻醉。

2、動(dòng)物麻醉后，經(jīng)腸壁穿刺逆行胰膽管注射，正中切口開(kāi)腹，輕拉出十二指腸，順膽胰管尋找十二指腸開(kāi)口，使用穿刺針在近十二指腸開(kāi)口端逆行刺入胰膽管，用動(dòng)脈夾夾住膽管入肝處。

3、以0.1mL/min速度向胰管內(nèi)勻速注射5%牛磺膽酸鈉溶液（按0.1mL/100g劑量），對(duì)照組使用等量生理鹽水替代牛磺膽酸鈉，注射完畢后留針8-10min，肉眼觀察胰腺顏色變暗紅，拔出穿刺針，松開(kāi)血管夾，并縫合穿刺的十二指腸壁以免腸液漏至腹腔，確認(rèn)腹腔無(wú)活動(dòng)性出血后層層縫皮即可。

注射后3、6、12、24h檢測(cè)血清淀粉酶水平、胰腺組織的濕/干質(zhì)量比率及病理組織學(xué)評(píng)分，觀察24h生存指數(shù)

病因、致病機(jī)制及病變與臨床急性出血壞死型胰腺炎(AHNP)相似，成功率高，重復(fù)性好，可比性高。但對(duì)操作者的技術(shù)熟練度要求較高。

圖2 12小時(shí)時(shí)胰腺的形態(tài)學(xué)變化和每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的胰腺組織學(xué)評(píng)分（引用自：dx.doi.org/10.1155/2015/685043）

實(shí)驗(yàn)采用雄性SPF Wistar大鼠，體重200~250g，穿刺逆行胰膽管注射5%牛磺膽酸鈉溶液誘導(dǎo)SAP，在不同時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行胰腺H&E病理切片染色，對(duì)胰腺病理進(jìn)行評(píng)分。

1. 雨蛙素誘發(fā)的急性胰腺炎動(dòng)物模型

2. L-精氨酸誘導(dǎo)胰腺炎模型（Acute pancreatitis, AP）