細胞凍存液的分類:
1、滲透性和非滲透性
滲透性保護劑分子量小可滲透到細胞內,如甘油、乙二醇等,非滲透性保護劑不能滲透到細胞內,多為大分子物質,如聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、葡聚糖等。
2、是否含血清
細胞凍存液含血清是從細胞生長環境角度考慮對細胞進行保護,但含血清(屬動物源成分)勢必需要考慮細胞污染、批間穩定性等因素,另外隨著細胞治療研究逐漸成為熱點,研究及生產過程的可預知、可控制要求,胎牛血清的使用液受到限制。
3、是否需要程序降溫
是否需要程序降溫是細胞凍存中需要考慮的另一個因素。常規細胞凍存液采用培養基+血清+DMSO配置,一般需要采用程序降溫凍存細胞(先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘,然后移至-20℃冰箱30分鐘,再移至-80℃冰箱保存16-18個小時(或隔夜),最后才移至液氮罐中進行長期的儲存)。
細胞凍存液的選擇:
1、細胞在凍存和溶解過程中的損傷減低到最小,細胞存活率高。
2、凍存細胞復溫后,其的細胞生物學特性無明顯影響。
3、細胞復溫后,低溫保護劑容易去除,成分清楚,對細胞、人體無毒副作用。
4、凍存保護劑可快速起效,減少操作步驟。
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