1.瓊脂平板的制備可以根據需要選擇大玻璃平板和小玻璃載玻片。大玻璃板需要約10毫升的瓊脂，小玻璃片需要約3.5毫升。固化后打孔。該方法與瓊脂擴散實驗相同。
2.添加樣品：在左孔中添加患者血清（原始血清和10倍稀釋血清各占據一個孔），在右側添加抗血清，每片均應有陽性對照。
3.電泳操作流程：在電泳槽高度的三分之二處添加0.05mPH8.6Barbita酸鹽緩沖液。請注意，兩個水箱中的液位盡可能高。將帶有樣品的玻璃板放在電泳槽上，將抗原端連接到負極，將抗體端連接到正極過濾紙浸濕后作為鹽橋，過濾紙與瓊脂板連接，其長度為0.5厘米。以板寬度計算電流，以板的長度計算電壓。要求電流量為2毫安/厘米，即大板為20毫安，小板為10毫安。電壓為5伏/厘米。通電2小時后觀察結果。
4.對流免疫電泳實驗結果觀察：在黑色背景上方，用多個角度的散射光觀察。兩口井之間有一條白色的沉淀線，這意味著陽性對照應該有一條清晰的白色沉淀線。如果是抗原，則兩極微沉淀條不清楚，將其在37°C下放置數小時可增強沉淀條的清晰度。