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制備液相色譜的操作規程

來源:Gilson中國-吉爾森實驗儀器(上海)有限公司   2023年05月08日 14:11  
  液相色譜(Liquid chromatography,LC)是一種常用的分離和分析技術,在藥物分析、生化分析、環境檢測等領域有廣泛應用。制備液相色譜操作規程如下:
 
  一、實驗器材準備
 
  液相色譜儀:選擇型號適合的液相色譜儀,并按照廠家提供的說明書正確安裝和調試。
 
  色譜柱:根據分析目標和樣品性質選擇合適的色譜柱,如C18、C8、Phenyl等。
 
  稱量儀:選擇精度高的電子天平或半自動秤,用于稱取溶液中各組分的質量。
 
  4.pH計:用于調節試劑的酸堿度,校準pH計。
 
  試劑:包括純水、有機溶劑、緩沖液等。
 
  二、實驗步驟
 
  樣品處理:對于復雜樣品需經過前處理,如離心、過濾、萃取等步驟。
 
  準備溶液:精確地稱取所需的試劑,配制成濃度適當的溶液。注意不同試劑之間的相容性。
 
  穩定樣品注射器:將樣品注射器放置在洗滌瓶中,用流動相(如純水)反復沖洗多次,直到樣品注射器內無氣泡為止。
 
  運行實驗:在處理好的樣品中加入色譜柱適合的溶劑,然后將樣品通過穩定的樣品注射器注入液相色譜儀中。選擇合適的工作模式(如等速排出、漸變洗脫等),開始運行實驗。
 
  記錄實驗數據:根據設備規格和實驗要求,在設定的時間內收集數據。注意記錄實驗過程中發生的任何異常情況。
 
  數據分析:對實驗所得數據進行處理和分析,以獲得所需結果。
 
  三、操作注意事項
 
  實驗室安全:進行操作前應熟悉實驗室安全規定,佩戴防護手套、眼鏡、面具等個人防護裝備,確保實驗操作的安全性。
 
  避免污染:所有實驗室儀器、試劑、耗材等都應保持干凈清潔,避免污染導致實驗誤差。
 
  標準曲線:根據實驗要求制備標準曲線,并在實驗過程中同時進行樣品和標準曲線的測量,以保證實驗結果的準確性和可靠性。
 
  操作規范:按照操作規程操作液相色譜儀,嚴格控制實驗參數,如流速、溫度、洗脫時間等,確保實驗結果的穩定性和可重復性。
 
  仔細記錄:對于實驗過程中發生的異常情況需及時記錄并排除,同時將實驗過程中的每個步驟詳細記錄下來,以便后期分析和查看。

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