外泌體（exosome）是一種由細胞內多泡體(multivesicular body，MVB) 與細胞膜融合后，分泌到細胞外基質中的膜性囊泡。在正常的生理過程中發揮著介導細胞間通訊的重要功能，可用于監測臨床狀態，治療反應，疾病進展等，同時由于它們具有遞送生物分子的功能，因此它們還有發展成臨床藥物遞送載體的潛力。

外泌體產生于所有類型的動植物細胞，并且不同細胞、不同生長狀態的細胞分泌的外泌體差異性很大，因此，為了得到更高濃度、異質性相對較小的外泌體，細胞培養上清是外泌體的最佳來源途徑，細胞培養上清中外泌體濃度低、粒徑小、粒徑分布廣（30-150nm，可能有大囊泡存在），實時定量監控外泌體分泌情況是工程化外泌體生產的重點也是難點。

納米庫爾特粒度儀（電阻法RPS）可在單顆粒水平對外泌體進行粒徑濃度分析，可無標記直接檢測任何培養基類型的細胞培養上清中的外泌體，精準得到外泌體樣本中的完整、真實的粒徑濃度分布，并且3-5分鐘即可完成檢測，是外泌體培養工藝開發中的得力助手，可助力篩選最佳的培養基以及培養條件。

01篩選無外源性培養基

傳統的培養基都會用到牛血清以補充細胞所需營養，但血清會或多或少引入外源性的外泌體，從源頭上造成了后續外泌體樣本的污染。通過其他成分代替牛血清，或者經過分離除去外泌體，已經有各種類型的無外源性外泌體培養基上市，但都真正做到了沒有污染嗎？針對這種疑問，筆者選取了八種不同的聲稱無外源性外泌體的培養基進行測試。

圖1.外泌體培養基測試

通過測試可見，并非所有的培養基都做到了真正的無外源性外泌體，還需擦亮您的眼睛，借助納米庫爾特粒度儀對其進行嚴格的篩選，挑選合適的培養基。

02培養條件優選

在通常的外泌體培養過程中，都是分離富集后再進行測定，若純度過低或含量太少，不符合下游研發需求，則需要重新進行培養，消耗大量的時間成本;亟需一種準確、可靠和快速的方法實時監控細胞培養過程中外泌體的分泌含量，使科研工作事半功倍，納米庫爾特粒度儀十分符合這種應用場景，使外泌體的研發更高效。

圖2.外泌體培養上清實時跟蹤測試

在對某培養條件的細胞上清進行跟蹤測試后發現，外泌體的濃度在培養第5天時達到峰值，往后濃度有所降低，并且粒徑分布也有所變化。

總結：

納米庫爾特粒度儀（電阻法RPS）在外泌體生產工藝研發應用中有以下優勢：

1.方便快捷，可以做到實時監測。

2.與樣本折射率無關，可應對各種成分的培養基。

3.單顆粒檢測，大小囊泡之間無互相影響，可得到真實的粒徑分布數據。

4.直接檢測外泌體體積粒徑，粒徑準確度媲美電鏡。

5. 精準的濃度測量，可分析不同粒徑范圍內的顆粒濃度。