PCR引物設(shè)計(jì)關(guān)鍵事項(xiàng)

來源：上海撫生實(shí)業(yè)有限公司 2023年05月29日 13:13

PCR引物設(shè)計(jì)需要注意：

1、引物長度：一般為15～30個(gè)堿基，引物太短會(huì)降低擴(kuò)增特異性。引物過長退火溫度會(huì)提高，不利于反應(yīng)的發(fā)生。

2、引物序列：設(shè)計(jì)引物時(shí)堿基要隨機(jī)分布，避免堿基或核苷酸的重復(fù)導(dǎo)致錯(cuò)誤引發(fā)；引物間和引物自身序列也要盡量避免互補(bǔ)，防止形成引物二聚體或發(fā)夾結(jié)構(gòu)。

3、堿基分布：GC含量一般40-60%，含量過高或過低都不利于進(jìn)行反應(yīng)。其含量過低會(huì)使引物不穩(wěn)定；過高會(huì)引發(fā)非特異性擴(kuò)增。

4、 Tm值：引物的Tm值（解鏈溫度）=4（G+C）+2（A+T），盡可能保證上下游引物的Tm值一致，一般不超過2℃。

5、引物設(shè)計(jì)好后進(jìn)行BLAST檢查，檢測(cè)是否與基因組中重復(fù)序列或其它基因位點(diǎn)有交叉同源；

6、引物的特異性：引物的3'端如果含有一個(gè)G或C殘基能增加引物的特異性。

相關(guān)產(chǎn)品

凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí)，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。

三级片视频播放,精品三级片在线观看,A级性爱视频,欧美+日韩+国产+无码+小说,亲子伦XX XX熟女,秋霞最新午夜伦伦A片黑狐,韩国理伦片漂亮的保拇,一边吃奶一边做边爱完整版,欧美放荡性护士videos