對新的生化法試劑盒，我們首先要查看其專業(yè)是否齊全，是否具有國家食品藥品監(jiān)督管理總局的相關(guān)批號，是否為合法有效試劑，是否有相關(guān)的研究試驗驗證等。其次，在本實驗室，可做以下工作來進行驗證是否適合使用。

一、試劑空白吸光度

用蒸餾水做空白，用空白液加入試劑作為樣品測試，在測試主波長下，記錄測試啟動時的吸光度(A1)和約5分鐘后的吸光度(A2)，A2測試結(jié)果即為試劑空白吸光度測定值，應(yīng)符合生物試劑企業(yè)給定范圍。這是判定試劑質(zhì)量的一個有效指標。

二、試劑空白變化速率

對于生化法試劑盒，用空白液加入試劑作為樣品測試時，在測試主波長下，記錄測試啟動時的吸光度(A1)和約5分鐘(T)后的吸光度(A2)，計算試劑空白吸光度變化率(DA/min)，應(yīng)不超過生物試劑企業(yè)給定值。測定試劑空白吸光度變化(ΔA/min)，用來檢查試劑在工作狀態(tài)下的穩(wěn)定性。但事實上，試劑空白吸光度變化速率無法反映試劑盒的穩(wěn)定性，試劑空白吸光度變化速率主要反映干擾程度和儀器的穩(wěn)定性。

三、分析靈敏度

用吸光度差值(ΔA)或吸光度變化(ΔA/min)來表示單位濃度的被測物反應(yīng)所引起的信號變化，其含義類似摩爾消光系數(shù)，應(yīng)符合生物試劑企業(yè)給定范圍。需要注意的是，分析靈敏度不是越高越好，以適合待測物檢測范圍為原則。分析靈敏度一般用于批間比較，較能反映制造商的配方、原料的一致性。

四、線性范圍

取高濃度樣品和低濃度樣品按不同比例混合成5個濃度做線性試驗。線性范圍內(nèi)的分析性能應(yīng)符合如下要求：①線性性相關(guān)系數(shù)r應(yīng)≥0.990；②線性偏差應(yīng)不超過生物試劑企業(yè)給定值。試劑(盒)的線性范圍越寬，研究復(fù)測幾率越小，但與樣品/試劑比例成反比。

五、重復(fù)性

1.批內(nèi)重復(fù)性在重復(fù)性條件下，用高、中、低三個水平濃度(高、低濃度應(yīng)超過參考區(qū)間20%～30%，中濃度水平在參考區(qū)間之內(nèi))的控制血清或新鮮科研血清測試試劑，重復(fù)測試至少10次。

2.批間重復(fù)性用質(zhì)量控制血清測試3×3(3個批號，每個批號取3瓶)批間差，較能反映制造商的配方、原料的一致性。干粉或凍干試劑還需測定批內(nèi)瓶間差，測定同一批號的試劑20瓶，用變異系數(shù)(CV)來表示。變異系數(shù)(CV)不超過生物試劑企業(yè)給定值。

六、準確度

1.相對偏差直接用生化法試劑盒測定參考物質(zhì)(平行3次)，評價測定均值與靶值的偏離程度。也可用由參考方法定值的高、中、低三個濃度的人混合血清，用試劑盒平行測定3次，計算均值與定值的相對偏差。

2.比對試驗既無參考物質(zhì)、參考血清，也無標準品，也可用比對試驗來驗證準確度。

七、校準品溯源、質(zhì)控品賦值

1.校準品溯源性根據(jù)GB/T21415及有關(guān)規(guī)定提供校準品的來源、賦值過程及測量不確定度等內(nèi)容，明確溯源途徑。

2.質(zhì)控品賦值有效性質(zhì)控品的測定結(jié)果應(yīng)在試劑盒規(guī)定的范圍內(nèi)。

八、穩(wěn)定性

1.效期穩(wěn)定性取已到效期的試劑盒按以上評價方法對生化法試劑盒性能指標進行評價。

2.熱穩(wěn)定性試驗生化試劑盒一般置2-8℃保存，為了快速有效地評價試劑盒的穩(wěn)定性，可以用加速試驗來估計。

3.開瓶穩(wěn)定性干粉試劑開瓶后(復(fù)溶后)在規(guī)定的儲存條件下保存至預(yù)期時間內(nèi)，產(chǎn)品的性能至少應(yīng)符合線性和準確度的要求。