使用細胞分離液的注意事項

來源：上海鹿森生物工程有限公司 2023年06月12日 17:09

一、分離方法會影響胰島的產(chǎn)率和存活率：

因此，取材時需要注意

1.胰臟應快速取材，保持包膜完整。

2.建議采用UW溶液運輸。

3.對胰臟進行評估，在消化酶灌注前去除多余的脂肪和殘留的十二指腸和脾臟。

4.消化過程不宜進行震蕩，以保證胰腺組織被灌注的消化酶液消化，而不是被胰腺所釋放的胰蛋白酶消化。

5.要保證胰島的包膜完整，消化不能太充分。寧可不足，也不可過頭，否則會影響胰島純化的產(chǎn)率。

二、分離胰島細胞時的注意事項：

1. biocoll分離液使用時，是采用連續(xù)密度梯度，需要分別配制密度為1.065g/mL（UW溶液與Biocoll混合）和密度為1.095 g/mL（UW溶液與Biocoll混合）的溶液，二者再混合。

2. 分離時離心1800rpm，可考慮離心10分鐘，之后使COBE細胞分離機保持4℃，防止酶激活導致結構完整性破壞。

3. 胰島在最輕密度層，隨著密度增加，也會有部分胰島，但外分泌組織也會增多。

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