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RNA 提取是指從樣品中純化 RNA 的過程。 RNA提取的常規(guī)方法稱為硫氰酸胍-苯/酚-氯/仿提取。 Guanidinium thiocyanate 使蛋白質(zhì)變性。此外，它破壞水分子的氫鍵并用作離液劑。 RNA 提取中使用一種特殊試劑，稱為三試劑。它含有硫氰酸胍、苯/酚和乙酸鈉。 RNA 提取的基本步驟的目的與 DNA 提取的目的相似。 RNA 提取的方案如下所述。
1. 用冰冷的 PBS 洗滌細胞以維持細胞的滲透壓。
2. 吸出細胞并用 Tri-reagent 勻漿樣品。
3. 加入氯/仿并搖勻。
4. 離心可能會出現(xiàn)三層。頂層是透明的水層。中間層或界面包含沉淀的 DNA。底層是有機層，呈粉紅色。
5. 除去水層并加入異丙醇。離心可能會產(chǎn)生沉淀。
6. 用 75% 乙醇清洗沉淀。空氣干燥顆粒。
7. 用 TE 緩沖液或水溶解沉淀。
RNA 提取一般在 pH 值低于 7 時進行。在堿性 pH 值下，由于核糖的 2' 位置存在 OH 基團，RNA 更容易被堿性水解降解。 此外，RNA 在酸性 pH 值下傾向于保留在水相中。
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