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方案背景
α- 羥基酸（Alpha Hydroxyl Acid，果酸，簡稱 AHA）是一類在分子結構的 α 位置具有羥基（或酮基）的有機酸，廣泛應用于清潔、護膚等化妝品中，具有抗細胞衰老、增強皮膚細胞再生、促進角質層剝離和除皺等作用。但此類成分在使用中存在刺激皮膚、增強皮膚對紫外線敏感性等問題，其安全性越來越受到重視。因此，α- 羥基酸是化妝品衛生管理的一項重要指標。
我國《化妝品安全技術規范》2015 版中規定化妝品配方中的 α- 羥基酸總量不得大于 6%，國家藥監局于 2019 年發布的第 12 號通告中提供了化妝品中 10 種 α- 羥基酸的檢測方法（以下簡稱“通告方法”），該檢測方法使用常規 C18 色譜柱（250 mm × 4.6 mm × 5 μm），一次分析需要 28 min，且部分樣品在酒石酸出峰位置受到基質干擾，分離效果較差。
本實驗采用 Agilent 1260 Infinity Ⅱ Prime 高效液相色譜系統和 Agilent Poroshell AQ-C18，4.6 × 100 mm，2.7 µm 色譜柱，建立了一種快速分析化妝品中 10 種 α- 羥基酸的方法。該方法一針僅需 12min，與通告方法相比，分析速度更快、分離度更好、分析效率更高。
安捷倫方案
色譜柱：Agilent InfinityLab Poroshell 120 Aq-C18，4.6 × 100 mm，2.7 µm（部件號 695975-742）
柱溫：25 °C
進樣量：5 μL
DAD 檢測器：檢測波長 214 nm，參比波長 360 nm，采集頻率 10 Hz
流動相 A：100 mmol/L 磷酸氫二銨溶液 (pH 2.8)
流動相 B：甲醇
梯度洗脫程序：
時間 (min) | B (%) | 流速 (mL/min) |
0 | 0 | 0.7 |
2.3 | 0 | 0.7 |
2.4 | 0 | 1.0 |
4.0 | 50 | 1.0 |
4.5 | 65 | 1.0 |
7.5 | 65 | 1.0 |
7.6 | 0 | 0.7 |
10 | 0 | 0.7 |
后運行時間 | 2 min | |
結果與討論
10 種 α- 羥基酸分離色譜圖
一針分析僅需要 12 min 即可快速分析 10 種 α- 羥基酸。
實際樣品加標色譜圖
實際樣品中基質干擾峰與目標化合物實現分離。
小 結
本實驗基于 Agilent 1260 Infinity II Prime 高效液相色譜系統，應用 Agilent Poroshell 120 Aq-C18，4.6 ×100 mm，2.7 µm 色譜柱，一針分析僅需 12 min 即可完成 10 種 α- 羥基酸的快速分離，分離度均可達到 2.5 以上，能夠滿足實際樣品中干擾物質的分離。適用于化妝品中 α- 羥基酸的快速定量分析檢測。
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