ELISA 實驗操作要點:液體樣本處理方法
液體樣本處理原則:所有的液體樣本,用無菌管收集,2-8℃ 條件離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。
1、血清:用無菌管收集,室溫血液自然凝固 10-20 分鐘,2-8℃ 條件離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分),仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2、血漿:應根據標本的要求選擇 EDTA、肝素鈉或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合 10-20 分鐘后,2-8℃ 條件離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3、尿液:用無菌管收集,2-8℃ 條件離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
4、胸腹水:用無菌管收集,2-8℃ 條件離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5、腦脊液:用無菌管收集,2-8℃ 條件離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
6、唾液:用無菌管收集,2-8℃ 條件離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
7、細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。2-8℃ 條件離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
8、牛奶:用無菌管收集,2-8℃ 條件離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
9、蜂蜜:用無菌管收集,2-8℃ 條件離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
樣本收集注意事項:
1、不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2、標本采集后盡快進行實驗,若不能馬上進行試驗,可將標本放于 -20℃ 保存,但應避免反復凍融。
3、我們羅列的是通用的樣本處理方法,無法涵蓋各種樣本,對于一些特殊樣本,建議實驗人員多參考已發表的文獻,自行設計合理的樣本處理方法。
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