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GPC凝膠凈化中如何判斷樣品純度?

來源:上海科哲生化科技有限公司   2023年07月03日 13:25  
   GPC凝膠凈化是一種基于體積排阻的分離技術,通常用于樣品的凈化。在GPC凝膠凈化中,樣品被流動相溶劑通過一個色譜柱,柱內填充有凝膠顆粒。樣品的純度可以通過以下幾個因素來判斷:
 
  1.紫外-可見吸收光譜(UV-Vis):GPC柱中的凝膠顆粒通常是非吸光的,因此,樣品的UV-Vis吸收光譜可以提供有關樣品純度的信息。如果樣品在紫外區域有明顯的吸收峰,這可能表明樣品中存在有吸光的雜質。如果樣品在紫外區的吸收非常弱,那么樣品可能更純。
 
  2.凝膠滲透色譜圖:GPC圖顯示了樣品在不同時間通過色譜柱的流出情況。通過GPC圖,可以觀察到樣品在柱內的分離情況以及是否存在雜質峰。如果GPC圖上的峰形尖銳且對稱,并且只有一個顯著的峰值,那么樣品可能較為純。如果出現多個峰值或者峰形不對稱,這可能表明樣品中存在雜質。
 
  3.折射率(RI):折射率是通過GPC技術測量的一種關鍵參數。它提供了一種間接的純度指示,通過比較樣品的RI值與標準品的RI值進行判斷。如果樣品的RI值與標準品的RI值非常接近,那么樣品可能較為純。
 
  4.多角度激光散射(MALS):MALS是一種直接測量樣品分子大小的技術,可以提供樣品的分子量和分布。通過與標準品的分子量進行比較,可以判斷樣品的純度。如果樣品的分子量分布與標準品的分子量分布非常接近,那么樣品可能較為純。
 
  5.高效液相色譜(HPLC):如果需要更深入的分析,可以使用HPLC對GPC凈化后的樣品進行進一步的分析。HPLC可以提供關于樣品中各組分的詳細信息,包括各組分的保留時間、峰形和紫外吸收等。如果HPLC圖上的峰形尖銳且只有一個顯著的峰值,那么樣品可能較為純。

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