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稱取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸餾水中，用HCl調節溶液的pH值至7.4，最后加蒸餾水定容至1L即可。在15lbf/in2(1034×105Pa)高壓下蒸氣滅菌（至少20分鐘），保存存于室溫或4℃冰箱中。
需要注意的是，通常所說的濃度0.01M 指的是緩沖溶液中所有的磷酸根濃度，而非Na 離子或K 離子的濃度，Na 離子和K 離子只是用來調節滲透壓的。如果是用于免疫組化的話，則需要在配置的時候分別加入100 u/ml青霉素和鏈霉素之后再調PH、定容、滅菌消毒。
NaCl 8.0g ； KCl 0.2g ； Na2HPO4 1.44g ； KH2PO4 0.24g ；加蒸餾水 至 1000ml，調節pH 到 7.4（用Na2HPO4或KH2PO4調節） 。
用于免疫反應時可加入 0.1%疊氮鈉（0.1g/100ml PBS）;當試劑中含有辣根過氧化物酶時，嚴禁使用疊氮鈉，可改用0.01%柳硫汞。
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