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翌圣ZymeEditor™轉(zhuǎn)座酶系列產(chǎn)品全面助力NGS文庫構(gòu)建

來源:翌圣生物科技(上海)股份有限公司   2023年07月20日 18:16  

TA克隆建庫技術(shù)是目前商業(yè)化建庫的主流方式,通常需要片段化、末修加A、接頭連接、PCR擴增等實驗流程,操作復雜,且建庫周期長。與TA克隆建庫技術(shù)相比,轉(zhuǎn)座酶法建庫在DNA片段化的同時給DNA片段加上測序接頭,可替代TA克隆中的片段化、末修加A、接頭連接步驟,在后續(xù)建庫擴增過程中,一步法PCR建庫就能獲得完整的用于測序的文庫,具有操作簡便、極大縮短建庫時長等優(yōu)點。


 

 

圖1. 基于Tn5酶的建庫流程

 

Tn5酶作為轉(zhuǎn)座酶法建庫的核心酶原料,在NGS領域應用十分廣泛,除了應用于DNA建庫外,還可應用于快速RNA建庫、ATAC、CUT&Tag、單細胞測序等技術(shù)。(點擊查看詳情)

 

翌圣ZymeEditor™酶改造平臺精心打造轉(zhuǎn)座酶系列產(chǎn)品:Tn5 TransposaseCat#14524ES)、pA-Tn5 TransposaseCat#14528ES)、pG-Tn5 TransposaseCat#14530ES)以滿足不同應用需求。

 

 

部分數(shù)據(jù)展示

 

1、5 U投入量無核酸外切酶殘留

將1 U/5 U的pG-Tn5 Transposase分別與底物DNA在37°C下孵育4 h,瓊脂糖凝膠電泳比較DNA譜帶變化。結(jié)果顯示翌圣pG-Tn5 Transposase在5 U投入量下無核酸外切酶殘留。

圖2.pG-Tn5 Transposase核酸外切酶殘留檢測

 

2、相同酶投入量下,片段化能力優(yōu)于其它品牌

分別使用翌圣及品牌A相同酶量的pG-Tn5 Transposase對200 ng gDNA進行片段化,Agilent 2100檢測片段大小分布,結(jié)果顯示:相同酶量下,翌圣pG-Tn5 Transposase片段化效果更好,酶活性更高。

圖3. pG-Tn5 Transposase片段化能力檢測

 

3、應用于CUT&Tag建庫產(chǎn)量更高

分別使用翌圣及品牌A相同酶量的pG-Tn5 Transposase對1000個細胞投入量樣本建庫,并對文庫測序后的數(shù)據(jù)進行分析,結(jié)果顯示翌圣pG-Tn5 Transposase文庫產(chǎn)量高于品牌A(圖4A),Mapping率相當(圖4B); 染色質(zhì)上的信號分布情況與品牌A一致(圖5)。

圖4. pG-Tn5 Transposase應用于CUT&Tag的文庫產(chǎn)量及Mapping率

 

圖5. pG-Tn5 Transposase應用于CUT&Tag在染色質(zhì)上的信號分布

 

 

產(chǎn)品推薦

 

應用

定位

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品貨號

轉(zhuǎn)座酶建庫ATAC建庫

 

Tn5單酶

Tn5 Transposase

14524ES

建庫試劑盒

Hieff NGS® Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina®(for 50 ng)

12207ES

CUT&Tag建庫

 

 

pA-Tn5單酶

pA-Tn5 Transposase

14528ES

pG-Tn5單酶

pG-Tn5 Transposase

14530ES

建庫試劑盒

Hieff NGS® G-Type In-Situ DNA Binding Profiling Library Prep Kit for Illumina

12598ES

 

 

 

翌圣ZymeEditor™

酶改造定制服務

 
 

翌圣ZymeEditor™是一個酶改造底層技術(shù)平臺,它基于翌圣生物多年在分子酶改造領域中的技術(shù)積累與知識拓展,該平臺已具備對多種酶的多種需求進行定向改造的能力。因此,ZymeEditor™平臺從2023年開始正式推出酶改造對外定制服務,可為各種應用領域(如醫(yī)藥、診斷、食品、化工等)的客戶提供全套酶改造服務,也可以單獨提供蛋白發(fā)酵及純化工藝開發(fā)優(yōu)化、規(guī)模化生產(chǎn)服務,以滿足不同客戶的需求,助力產(chǎn)業(yè)升級。

 

 
 
 
定制服務流程



圖6.ZymeEditor™酶改造定制服務流程



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