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2x 長片段PCR 擴增 預混液( long fragment PCR Master Mix)說明書

來源:上海起發生物科技有限公司   2023年08月23日 15:33  

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使用方法
  1. 充分溶解并混勻PCR反應所需的各種溶液。將2x 長片段PCR 擴增 預混液( long fragment PCR Master Mix)置于冰浴上或冰盒內。參考下表在冰上設置PCR反應:

Component20uL RXN25uL RXN50uL RXNFinal Concentration
2x 長片段PCR 擴增 預混液10uL12.5uL25uL1 ×
10uM Forward Primer0.4uL0.5uL1.0uL0.2uM
10uM Reverse Primer0.4uL0.5uL1.0uL0.2uM
Template DNAvariablevariablevariablevariable
Nuclease-Free Waterto 20uLto 25uLto 50uL
2 . 不同模板最佳反應濃度有所不同,反應體系推薦模板使用量可參見下表。
Template DNA20uLRXN25uL RXN50uL RXN
Genomic DNA4ng-0.4ug5ng-0.5ug10ng-1ug
Plasmid or Vrial4pg-4ng5pg-5ng10pg-10ng
cDNA4pg-0.4ug5pg-0.5ug10pg-1ug
3. 用移液器輕輕吹打混勻或輕微Vortex混勻,室溫離心數秒,使液體積聚于管底。
反應程序
1 .退火溫度應根據引物Tm值進行調整(50-72℃)。
2. 延伸時間需根據擴增片段的長度和復雜性進行調整。
3. 各設置好的PCR反應管置于PCR儀上,開始PCR反應。
STEPTEMPTIME
Initial Denaturation98°C30 sec
25–35 Cycles98°C10 sec

50–72 °C15 sec

72°C15-30 sec/kb
Final Extension72°C5 min
Hold4–10 °C
運輸及保存方法
-20℃ 保存 一年 干冰運輸


貨號品名規格品牌
78DC10152-1ml2x 長片段PCR 擴增 預混液(long fragment PCR Master Mix)1mlBIOHUB
78DC10152-5ml2x 長片段PCR 擴增 預混液(long fragment PCR Master Mix)5mlBIOHUB
78DC10152-3*5ml2x 長片段PCR 擴增 預混液(long fragment PCR Master Mix)3*5mlBIOHUB







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