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想快速區分不同胰蛋白酶？這三點是關鍵！
胰蛋白酶
理化性質
胰蛋白酶是從牛、豬、羊的胰臟提取，通過多重結晶方式純化，并進一步采取層析及超濾技術制備而得。該酶易溶于水，不溶于、乙醇、等有機溶劑。在pH1.8時，酶短時間煮沸幾乎不失活，在堿溶液中加熱則會變性沉淀。Ca2+對酶有保護和激活作用，胰蛋白酶的等電點為pH10.1。胰蛋白酶作為肽鏈內切酶，對精氨酸和賴氨酸肽鏈具有選擇性水解作用。早期的胰蛋白酶在生物制藥領域的主要應用是胰島素的生產，很快也在其他細胞培養領域應用起來。動物胰酶普遍用于血清培養，不同細胞加入的酶濃度不一樣。
應用范圍
胰島素、滅活疫苗生產
組織細胞分離及培養
臨床外科使用
食品行業加工助劑
重組胰蛋白酶
理化性質
重組胰蛋白酶是一種使用基因工程技術生產的酶，具有穩定性好、純度高、無動物來源的優點。市場主流的重組胰蛋白酶是利用DNA重組技術在大腸桿菌或酵母中表達的重組豬胰蛋白酶，其氨基酸序列與豬胰蛋白酶一致，具有與天然胰蛋白酶相同的活性和特異性。其由223個氨基酸構成，含有6對二硫鍵。該酶包含兩種胰蛋白酶活性形式：α-胰蛋白酶和β-胰蛋白酶。其活性受絲氨酸蛋白酶抑制劑如PMSF和TLCK等、金屬離子螯合劑如EDTA等的抑制。重組胰酶用于無血清培養，同胰蛋白酶一樣，不同細胞加入的酶濃度不一樣。
應用范圍
疫苗和重組胰島素生產
細胞分析的組織樣本制備
免疫細胞治療
生物藥物生產
蛋白質序列、結構及組學研究
分類 | 胰蛋白酶 | 重組胰蛋白酶 | 重組胰蛋白酶（質譜級） |
來源 | 取自牛、豬、羊的胰臟 | 大腸桿菌或酵母重組表達 | 畢赤酵母重組表達 |
安全性 | 潛在病原污染 | 無外源性病毒污染 | 無外源性病毒污染 |
純度 | 1：250胰蛋白酶溶液中90%以上為雜質 | 高純度（β-trypsin≥70%， α-trypsin≤20%） | 高純度（β-trypsin>80%， α-trypsin<20%） |
糜蛋白酶 | 每2500單位胰蛋白酶中不得多于50單位的糜蛋白酶。 | 無糜蛋白酶等雜酶污染 | 無糜蛋白酶等雜酶污染 |
比活 | / | ≥3800 USP units/mg 蛋白 | >6800 USP units/mg蛋白 |
消化效果 | 不穩定 | 消化能力強，酶用量少 | 消化能力強，酶用量少 |
自切率 | 容易自切產生自身自切片段影響質譜分析結果 | 容易自切產生自身自切片段影響質譜分析結果 | 經過特殊處理保證其不自切 |
Maarof Manira[1]等人研究了不同胰酶對皮膚細胞培養的影響。在這項研究中，全層人皮膚經過膠原酶消化后釋放成纖維細胞，分別使用胰蛋白酶EDTA溶液（TE）和重組胰蛋白酶溶液（TS）處理細胞，發現在細胞的培養擴增過程中，用TE或TS處理的人角質形成細胞和成纖維細胞的總細胞產量相當（見圖1）；通過定量RT- PCR和免疫細胞化學方法（ICC）分析TE和TS對I型膠原（Col-I）、III型膠原（Col-III）、細胞角蛋白10（CK10）和細胞角蛋白14（CK14）的基因和蛋白表達水平影響，發現與TE相比，TS除Col-III外的皮膚特異性基因表達更高，蛋白表達水平相似（見圖2,4）。研究數據反饋，重組胰蛋白酶（TS）表現出更溫和的消化效果，能夠保持高細胞活力和細胞產量。
產品名稱 | 貨號 | 規格 |
PerfCell™ Trypsin-EDTA (0.25%), Phenol red 胰酶-EDTA溶液（0.25%），無酚紅 | 40123ES60 | 100 mL |
PerfCell™ Trypsin-no EDTA (0.25%), no phenol red 胰酶-無EDTA溶液（0.25%），無酚紅 | 40124ES60 | 100 mL |
PerfCell™ Trypsin (0.25%), phenol red 胰酶溶液（0.25%），含酚紅 | 40126ES60 | 100 mL |
PerfCell™ Trypsin-EDTA (0.25%), Phenol red 胰酶-EDTA溶液（0.25%），含酚紅 | 40127ES60 | 100 mL |
Trypsin 1:250(powder) 胰蛋白酶1:250(粉末) | 40101ES25 | 25 g |
PerfCell™ Recombinant Trypsin（powder）重組胰蛋白酶（粉末） | 40512ES10/60 | 10 mg/100 mg |
Recombinant Trypsin（MS-SAFE）重組胰蛋白酶（質譜級） | 20416ES60 | 100 µg |
PerfCell Tryzyme™Express 酶 (1X)，含酚紅 | 40134ES60 | 100 mL |
PerfCell Tryzyme™Express 酶 (1X)，無酚紅 | 40135ES60 | 100 mL |
參考文獻：
[1]Manira M, Khairul Anuar K, Seet WT, Ahmad Irfan AW, Ng MH, Chua KH, Mohd Heikal MY, Aminuddin BS, Ruszymah BH. Comparison of the effects between animal-derived trypsin and recombinant trypsin on human skin cells proliferation, gene and protein expression. Cell Tissue Bank. 2014 Mar;15(1):41-9.
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