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如何提高噬菌體展示文庫的庫容?

來源:北京和一生物科技有限公司   2023年10月19日 15:05  

 噬菌體展示技術將基因型和表型統一于同一噬菌體顆粒,相較于傳統的抗體制備技術,提供了不經免疫制備抗體的可能,可以解決因為弱抗原、自身抗原、具有毒性的抗原等抗體制備的困難。因此也是目前抗體庫制備中應用十分廣泛的一項技術。

一個好的噬菌體抗體庫需要具備較大的容量和良好的多樣性,如果庫容量較小,則難以獲得高親和力的抗體。那么想要獲得較大庫容和多樣性豐富的噬菌體文庫,有哪些可以優化的因素呢?
 

一、選擇高轉化效率的大腸桿菌(感受態細胞)

噬菌體文庫的庫容會受大腸桿菌轉化效率的限制,選擇高效率的電轉感受態細胞,能有效的增加噬菌體文庫的庫容,另外也可以通過增加轉化次數來累積庫容。在噬菌體展示文庫構建過程中,使用比較多的感受態細胞有TG1、XL1-Blue、SS320等。

在進行轉化實驗時,要想獲得高的轉化效率,質粒/連接產物的純度、電轉的條件、質粒/連接產物的加入量以及操作的規范性也是需要注意的地方。



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