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什么是 PicoGreen™ 定量?

來源:上海牧榮生物科技有限公司   2023年10月31日 18:11  

PicoGreen dsDNA 定量試劑是一種高靈敏度熒光核酸染色劑,用于定量雙鏈 DNA。PicoGreen 廣泛用于分子生物學程序,例如用于亞克隆的 DNA 片段純化、用于文庫生成的 cDNA 合成以及引物測定。

PicoGreen 定量的優點

廣泛使用的核酸濃度測量方法是測定 260nm 處的吸光度 (A260)。這被稱為吸光度方法,由于測量速度快、不需要試劑盒或試劑的直接定量以及現代微量儀器的寬動態范圍而被廣泛使用。 熒光方法通常用于由于單鏈核酸、蛋白質和核苷酸的污染而需要進行特定定量的情況,這些單鏈核酸、蛋白質和核苷酸可能會影響使用吸光度的總信號。此外,核酸制劑中經常存在的污染物可能會造成干擾,并且無法區分 DNA 和 RNA。

Hoechst(雙苯甲亞胺)染料也是敏感的核酸染色劑。然而,該測定的選擇性稍高,無法用于 dsDNA,并且在蛋白質存在時不會顯示出顯著的熒光增強。

PicoGreen dsDNA 定量分析可選擇性檢測低至 25 pg/ml 的 dsDNA,其中存在的 ssDNA、RNA 和游離核苷酸對熒光強度的影響極小。該檢測呈線性跨越三個數量級,并且具有少量的序列依賴性,這意味著可以從一系列來源(例如基因組 DNA、病毒 DNA、小量制備 DNA 或 PCR 擴增產物)精確測量 DNA。

PicoGreen dsDNA 定量非常適合基于 PCR 的測定、DNA 損傷測定、基因組 DNA 定量、微陣列樣品、測量復雜混合物中的 dsDNA 以及病毒 DNA 定量。

用于 PicoGreen 定量的 QFX 熒光計

QFX 熒光計是同類儀器中靈敏、重現性好的儀器。對于需要增強特異性或靈敏度的熒光測定應用來說,它是一種強大的解決方案。該儀器能夠使用四個用戶可選的熒光通道來定量核酸和蛋白質,從而允許使用所有主要的定量測定。QFX 熒光計提供的數據質量以及強大的軟件和網絡集成,可實現無縫數據處理。屢獲殊榮的 DS-11 系列分光光度計/熒光計還集成了完整的熒光功能。

當 QFX 與 DeNovix 的熒光檢測結合使用時,它可以定量 0.5 pg/μL 至 4000 ng/μL 范圍內的 DNA,是定量降解、污染或低濃度樣品的最佳解決方案。

DeNovix 熒光計的主要優點之一是科學家可以選擇使用任何制造商的檢測方法,包括 PicoGreen dsDNA 或 QuantIT™ 檢測方法。


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