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恒遠生物|細胞培養需知

來源:上海恒遠生物科技有限公司   2023年11月07日 10:01  

隨著時代的發展,現如今的生命科學事業也在蓬勃發展,國內越來越多的實驗室開始做起了細胞培養的相關實驗,如果你打算或者是正在做細胞培養的實驗那么以下的內容會對你的實驗有所幫助。


1、選擇正確的培養基


      在養細胞之前,就要了解,你所養細胞的來源以及種類和名稱,查閱一定量的文獻,確定所需培養液種類以及是否需要添加特殊成分,常用的細胞培養液有DMEM、RPMI1640、F12等等,一些常見的細胞基本可以使用這幾種培養基中的一種來培養,有的需要加入一定其他成分,這需要根據不同的細胞類型,查ATCC細胞庫或者查文獻,才能找到所需要的培養液。(選擇正確的培養液是養好細胞的第1步)


2、了解細胞的生長習性


      不同的細胞生長習性不同,如成纖維細胞是貼壁生長,有一定的密度依賴性,密度小可能會出現不增殖,狀態差的情況,接種密度大時則需要隔天傳代,頻繁傳代則影響細胞狀態;再如RPMI-8226人多發性骨髓瘤細胞,是懸浮生長的,傳代需離心棄去上清即可。總之,了解細胞生長習性,再加上正確的計數,才能掌握好傳代的密度。


3、選擇優質的血清


      血清中含有細胞生長所必須的生長因子,作為哺乳動物細胞培養的附加物,血清的添加是十分重要的,因此,選擇優質的血清,是細胞養殖成功與否的關鍵!


4、及時傳代和更換培養液


      在細胞增殖到一定的密度后要及時傳代,根據細胞的生長速度和密度,及時更換培養液。更換過勤,浪費培養液,若不夠及時,則細胞狀態轉差,一般需隔天更換培養液,具體可根據所養細胞種類予以調整。


5、絕對的無菌意識


       如果無菌意識差,當細胞中混入了微生物,將會導致實驗功虧一簣,細菌的生長速度和破壞力,將迅速占領培養皿,破壞細胞結構,有些初學者會在培養液中加入1%的雙抗,但無菌意識不強,雙抗亦無法拯救你的細胞!所以在培養細胞的過程中需要有這絕對的無菌意識才可保障細胞培養完好。


6、傾心的呵護,頻繁的觀察


      做到以上幾點,就可以開始養你的細胞了,但需要再次和大家強調的是細胞嬌弱,在養細胞的過程中,難免會出現一些問題,要想成功培養好細胞,應時時注意并且不斷地對細胞進行觀察,初期一天可以觀察個兩次以上,出現任何預料外的情況應及時處理,才能保障后期收獲一盤“漂亮”的細胞。


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