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ELISA試驗(yàn)陰性與陽(yáng)性對(duì)照平均值計(jì)算與判斷

來源:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司   2023年11月20日 15:22  

陰性與陽(yáng)性對(duì)照平均值計(jì)算與判斷:  
1.陰性對(duì)照平均值NCx有效性計(jì)算判斷舉例:   
(1)第一類NCx計(jì)算與評(píng)價(jià):以HBsAg為例
Ⅰ. 設(shè)置3孔的NCx計(jì)算:NCx=(0.011+0.010+0.090)/3=0.010  
Ⅱ. 任一個(gè)NC值應(yīng)≤0.100至≥-0.010; 
Ⅲ. 各NC值也應(yīng)介于≥0.5×NCx至≤1.5×NCx之間。此時(shí)各孔的NC值均處于NCx±0.006范圍內(nèi),其中遇有一孔NC值偏離該范圍時(shí),則棄去該NC值,再計(jì)算NCx。如有2孔NC值超出該范圍時(shí),本次試驗(yàn)(無效)應(yīng)予復(fù)試。   
Ⅳ. 不同廠牌對(duì)NCx的具體要求略有不同,但總的原則幾為一致,如<法>巴斯德HBsAg EIA Kit。 
(2)第二類NCx計(jì)算與評(píng)價(jià):可包括抗—HBc、抗—HBe。以抗—HBc、抗—HBe為例: 
Ⅰ. 取3孔陰性對(duì)照A值的平均值: 
抗—HBc NCx=(1.027+0.989+1.278)/3=1.065  
抗—HBe NCx=(1.169+1.088+0.993)/3=1.083;   
請(qǐng)各位注意:這2個(gè)NCx是不是很接近1.00呀?也就是說,十分接近C.O.I.(C.O./S,或C.O./A)=1.00!這不是一種偶然,而是國(guó)際試劑(如雅培)的“質(zhì)量”標(biāo)志。如果偏大,例如1.50以上,或者偏小,0.50以下,待檢樣本中會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)什么現(xiàn)象呢?請(qǐng)讀者自己思考吧。 
Ⅱ. 各孔NC值均應(yīng)<2.000,并處于≥0.5×NCx至≤1.5×NCx之間。若其中1孔NC值偏離該范圍時(shí),棄去,再計(jì)算2孔的NC值的NCx。如有2孔NC值偏離該范圍時(shí),應(yīng)重新試驗(yàn)。
2.陽(yáng)性對(duì)照平均值PCx有效性計(jì)算與評(píng)價(jià)也分為兩類:   

(1)第一類 PCx計(jì)算與評(píng)價(jià):以HBsAg為例 DauI*sZmR  
Ⅰ. 第一類PCx的計(jì)算不列入Cut off計(jì)算,可取(設(shè))2—3孔陽(yáng)性對(duì)照的平均值PCx(Abbott): PCx=(1.024+1.030)/2=1.027。注意:本例雅培試劑HBsAg的Cutoff值=NCx+0.05=0.06,PCx 的S/C.O.=1.027/0.06=17.12。如果S/C.O.超過20.00以上,提示HBsAg陽(yáng)性對(duì)照含量太高!
Ⅱ. 參照方法學(xué)的要求,也可規(guī)定PCx應(yīng)≥1.000(指A值),而且各孔PC值要求≥0.5×PCx 至≤1.5×PCx  
Ⅲ. PC的設(shè)置及PCx的計(jì)算,主要用于評(píng)價(jià)本次試驗(yàn)結(jié)果是否有效和各批/次試驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性和可比性,并不參與Cut off值的計(jì)算。同一個(gè)批號(hào)試劑及其陽(yáng)性對(duì)照品在規(guī)定保存條件和有效期內(nèi),各次試驗(yàn)時(shí)PCx值也應(yīng)保持相對(duì)穩(wěn)定水平。換句話說,實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性評(píng)價(jià)時(shí),也應(yīng)觀測(cè)陽(yáng)性對(duì)照的“統(tǒng)計(jì)過程控制”(SPC)處于穩(wěn)定狀態(tài)—輸出“控制圖”。 
(2)第二類PCx的計(jì)算與評(píng)價(jià):也以抗—HBc為例 
Ⅰ. 可取(設(shè))2—3孔PC 的A值得平均值PCx: PCx=(0.051+0.038)/2=0.045  
Ⅱ. 參照方法學(xué)要求,也可規(guī)定各孔PC值應(yīng)處于≥0.5×PCx 至≤1.5×PCx范圍內(nèi)。  
Ⅲ. PCx值參與Cut off值的計(jì)算,例如抗—HBc的Cut off(Abbott):  
Cut off=0.4(NCx)+0.6(PCx)。
該值(Cut off)可以理解為:指示性定量HBcAg反應(yīng)值的40%加定量抗—HBc反應(yīng)值的60%之和,恰為健康人群血中抗—HBc正常值范圍的界限。任一待檢樣本的檢出值低于該Cut off值時(shí)則判為抗—HBc陽(yáng)性,大于該Cut off值時(shí)則判為抗—HBc陰性。


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