手機版
化工儀器網(wǎng)手機版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關注視頻號
新品|T5核酸外切酶攜手無縫克隆，確保100%陽性克隆率，讓實驗更簡單高效！
T5 Exonuclease是一種沿5'→3'方向降解DNA的核酸外切酶。它既能從DNA 5'末端起始消化，也可以從線性或環(huán)狀雙鏈DNA的缺口(gap)或缺刻(nick)處起始消化，但不會降解超螺旋雙鏈DNA。可應用于無縫克隆（同源重組克隆）、降解堿裂解提取質(zhì)粒中的變性DNA等。
圖1. T5 Exonuclease原理圖
切割：T5 Exonuclease從DNA片段的5'端切割一條鏈，產(chǎn)生DNA 3'突出末端。之后互補的DNA片段同源末端進行退火配對結合，形成一個有間隙的環(huán)狀DNA；
填補：Phusion DNA高保真DNA聚合酶通過DNA合成填補間隙，產(chǎn)生一個只有缺刻的環(huán)狀DNA；
連接：Taq DNA連接酶通過形成磷酸二酯鍵修復缺刻，得到一個完整的雙鏈DNA，也就是完整的環(huán)狀質(zhì)粒。
圖2. 無縫克隆原理圖[1]
翌圣T5 Exonuclease(Cat#14538ES)由翌圣鎂孚泰生物ZymeEditor酶進化平臺經(jīng)過重組表達獲得，無切口酶殘留，應用于無縫克隆，陽性克隆率可達100%！
應用到無縫克隆，陽性克隆100%
使用T5 Exonuclease進行無縫克隆，分別連接2、3、4個片段，實驗結果表明，翌圣T5 Exonuclease運用到無縫克隆中，陽性克隆率可達100%（12/12）。
圖3. 無縫克隆效果圖
無切口酶殘留
將30 U不同批次的T5 Exonuclease分別與相應的底物DNA在37℃孵育4 h，瓊脂糖凝膠電泳檢測結果表明，翌圣T5 Exonuclease無切口酶殘留。
圖4. 切口酶檢測
應用場景 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品貨號 |
Gibson組裝 | T5 Exonuclease | 14538ES |
Hieff Canace® Plus High-Fidelity DNA Polymerase 高保真DNA聚合酶 | 10153ES | |
Taq DNA連接酶 | 11051ES | |
無縫克隆 | Hieff Clone® Universal One Step Cloning Kit | 10922ES~10923ES |
質(zhì)粒抽提 | MolPure® Endo-free Plasmid Mini Kit 無內(nèi)毒素質(zhì)粒小量提取試劑盒 | 19021ES |
相關產(chǎn)品
免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權或有權使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權使用作品的，應在授權范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關法律責任。
- 本網(wǎng)轉載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉載時，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權等問題，請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關權利。
采購中心